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菜籽源锌螯合肽的制备、纯化和结构解析

文献类型： 中文期刊

作者： 黄晶晶 1 ; 谢宁宁 1 ; 李博 2 ; 程江华 1 ; 王灼琛 1 ; 殷俊峰 1 ; 闫晓明 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院农产品加工研究所

2.中国农业大学食品科学与营养工程学院

关键词： 锌;菜籽蛋白水解物;螯合肽;固定金属亲和层析;碱性蛋白酶

期刊名称： 中国粮油学报

ISSN： 1003-0174

年卷期： 2016 年 31 卷 06 期

页码： 68-73+78

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用碱性蛋白酶水解菜籽蛋白制备水解物,运用固定金属亲和层析(IMAC-Zn2+)和葡聚糖凝胶G25(Sephadex G25)层析分离纯化;利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)鉴定序列;采用EDTA络合滴定法(ECT)、双硫腙比色法(DCM)、原子吸收光谱(AAS)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测锌螯合率。试验表明:菜籽蛋白的4 h水解物锌螯合潜力最佳;分离该水解物获得3个肽组分(I,Ⅱ和Ⅲ),其中Ⅱ和Ⅲ具有锌螯合能力;进一步分离后分别获得3个(Ⅱ-1,Ⅱ-2,Ⅱ-3)和2个肽组分(Ⅲ-1和Ⅲ-2),组分Ⅱ-3的锌螯合率最高,高于同浓度的谷胱甘肽(GSH)(P<0.05);鉴定Ⅱ-3序列获得4条肽,即Ala-Arg(AR),Asn-Ser-Met(NSM),Gly-Lys-Arg(GKR)和Glu-Pro-SerHis(EPSH)。其中NSM的锌螯合率最高,来源于菜籽蛋白NADH-enoyl-ACP reductase Chain A序列中的296-298氨基酸残基。因此,菜籽蛋白可以作为微量元素螯合肽的优良来源。

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