科研产出
猪流行性腹泻病毒N蛋白纳米抗体的筛选与鉴定
《华北农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的高度接触性胃肠道传染病对我国养猪业造成巨大的经济损失。为建立PEDV抗体检测方法及N蛋白的功能研究奠定基础，通过噬菌体展示技术针对PEDV N蛋白进行筛选获得其特异性的纳米抗体（Nb）。利用前期制备的N蛋白免疫羊驼，采集其外周血并分离淋巴细胞，提取细胞总RNA,反转录为cDNA,通过PCR扩增重链抗体重链可变区（VHH）,插入pCANTAB5E-ccdb载体，电转化至ER2738感受态细胞，构建VHH噬菌体展示文库；随后，以PEDV N蛋白作为靶向蛋白，对文库进行4轮淘选获得阳性噬菌体，将其克隆至pET-30a载体，表达纯化后通过间接ELISA、Western Blot鉴定Nb的结合力和特异性。结果显示，羊驼经5次免疫后，抗体效价达到1∶25 600。构建的噬菌体展示文库库容为4.72×10～8,丰度为4.3×1010 cfu/mL,阳性率为93.75%。经过4轮筛选，获得16株氨基酸序列不同的Nb,随后验证了Nb45与PEDV N蛋白具有良好特异性和结合能力。研究筛选获得了PEDV N蛋白特异性Nb,为PEDV检测方法的建立和基础研究提供生物材料。
关键词： 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 噬菌体展示 纳米抗体 特性鉴定
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生物制剂对水稻发芽影响及对水稻纹枯病药效试验
《安徽农业科学 》 2024
摘要：[目的]探索生物制剂对水稻发芽出苗的影响及对水稻纹枯病的防治效果。选择3种生物制剂和2种化学制剂进行研究。[方法]选择3种生物制剂(5%井冈霉素A可溶液粉剂、20亿孢子/g蜡质芽孢杆菌可湿性粉剂和12%井冈·蜡芽菌水剂)和2种化学制剂(430 g/L戊唑醇悬浮剂和40%苯醚甲环唑悬浮剂)对水稻进行安全性评价，对水稻纹枯病菌室内毒力测定以及大田田间防效试验，研究5种药剂对水稻纹枯病的防治效果，确定田间应用效果。[结果]通过室内毒力测定得出蜡质芽孢杆菌和井冈霉素复配4∶1的增效作用最为明显。室内5种药剂拌种对不同品种水稻3 d的发芽势在49.33%～58.67%,7 d的发芽率在89.00%～93.00%,14 d盆栽试验的出苗率在90.67%～93.33%;各药剂对水稻的发芽和出苗均无影响。12%井冈·蜡芽菌水剂第7天的田间防效为79.61%。430 g/L戊唑醇悬浮剂的田间防效为67.38%,40%苯醚甲环唑悬浮剂的田间防效为68.44%。[结论]生物制剂12%井冈·蜡芽菌水剂在大田试验中能明显提高作物产量，对农业绿色防控技术推广具有重要意义。
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水稻永久温敏核不育遗传特性浅析
《广东农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]创制永久温敏核不育系,为解决两系杂交水稻制种存在的安全问题提供支持.[方法]在采用轮回亲本聚合温敏和反温敏核 不育基因创制永久温敏核不育系天丰M的基础上,研究天丰M不育的遗传特性.[结果]聚合了温敏和反温敏核不育基因的天丰M在高、低温下均表现不育,其不育性受 2 对基因控制,1 对是温敏核不育等位基因,另 1 对是受温度调节的调控基因,即分别来自温敏和反温敏核不育系复等位的,随温度变化切换显隐性关系.在高温下,来自温敏的为显性,调控不育基因表现为不育;在低温下,来自反温敏的切换为显性,同样调控不育基因表达为不育.从不同温敏和反温敏核不育姊妹系测交类型 4 的群体分离表现得到证实,C31(Z1×F7)组合在低温下表现不育、可育和正常可育,不育株割茬再生发生不育与可育分离,实际表现为永久不育5株、低温不育高温可育6株、低温可育4株、正常可育7株,符合2对杂合基因1∶1∶1∶1分离比.这种受双基因控制的永久温敏核不育性可遗传、可恢复,且当温敏核不育基因为显性时,永久不育性可恢复.[结论]天丰M不育系可从根本上解决两系杂交水稻的制种安全问题.
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安徽省稻田千金子对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性及其靶标分子机制
《植物保护学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为明确安徽省稻田杂草千金子Leptochloa chinensis对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性，从安徽省12个市38个县（市、区）稻区千金子发生较严重的田块中共采集72个千金子种群，采用整株生物测定法检测其对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性，筛选同时对噁唑酰草胺和氰氟草酯有疑似抗性的千金子种群并测定其对这2种药剂的抗性水平，同时利用分子生物学技术检测千金子高抗种群的乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase,ACCase）基因是否发生抗性位点氨基酸突变。结果显示，在72个千金子种群中，13个千金子种群已对氰氟草酯产生抗性，5个千金子种群已对噁唑酰草胺产生抗性；AH-1、AH-3、AH-7、AH-34和AH-72这5个千金子种群同时高抗氰氟草酯和噁唑酰草胺，其中对氰氟草酯的抗性指数介于21.98～65.52之间，对噁唑酰草胺的抗性指数介于11.76～27.19之间；这5个种群的ACCase基因片段均在2 027位点发生氨基酸突变，色氨酸突变为半胱氨酸；此外AH-3和AH-72这2个种群在1 999位点也由色氨酸突变为半胱氨酸，表明安徽省千金子已经对氰氟草酯和噁唑酰草胺产生交互抗性，且ACCase基因突变可能是产生抗性的主要原因。
关键词： 千金子 氰氟草酯 噁唑酰草胺 抗性 突变位点 靶标抗性
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鲜食型紫甘薯新品种皖苏361的选育
《中国种业 》 2023
摘要：针对市场上紫甘薯品种较少、产量低、食用口感较差等问题,安徽省农业科学院作物研究所与江苏省农业科学院粮食作物研究所合作,以宁N26-2 为母本,与多父本进行集团杂交,经高低世代组合筛选,育成鲜食型紫甘薯新品种皖苏 361,于 2022 年 9 月完成品种登记,登记编号:GPD甘薯(2022)340044.该品种薯块纺锤形,薯皮紫色,薯肉浅紫色,鲜薯产量26530.5kg/hm2,较对照宁紫薯 1 号增产 8.40%,薯块干率 31.50%,鲜薯花青素含量 7.79mg/100g,食味评分 75.35 分,比宁紫薯 1号高3.15分.抗蔓割病,中抗根腐病,耐储藏,可作为鲜食型紫甘薯品种在长江中下游薯区种植.
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皖南黄兔繁殖性能的选育进展分析
《甘肃农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]掌握皖南黄兔的繁殖性能和选育进展.[方法]对系统选育过程中5个世代的胎产仔数、胎产活仔数、初生窝重、哺乳数、3周龄窝重、4周龄断奶仔兔数、4周龄断奶窝重进行测定,并采用BLUP方法评估了胎产活仔数、3周龄窝重和4周龄断奶仔兔数的遗传力和育种值.[结果]通过皖南黄兔连续5个世代的繁殖性能选育,其胎产仔数达到7.34只、胎产活仔数7.23只、初生窝重391.11 g、哺乳数6.98只、3周龄窝重2180.61 g、4周龄断奶仔兔数6.68只、断奶窝重3477.08 g、断奶成活率95.98%;胎产活仔数、3周龄窝重和4周龄断奶仔兔数属于低遗传力性状,其育种值世代平均遗传进展分别为0.0175只、17.91 g和0.0196只.[结论]通过系统选育,皖南黄兔繁殖性能均有提高,且群体整体度好,遗传性能趋于稳定.
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牛GDF8基因编码蛋白结构和功能预测
《中国草食动物科学 》 2023
摘要：旨在探究GDF8基因(Growth differentiation factor 8)编码蛋白的结构和功能,对后期研究其生理机制提供理论依据.利用生物信息学技术对牛GDF8蛋白二级和三级结构进行了预测,分析了保守结构域、信号肽剪切位点、理化性质、亲疏水性、亚细胞定位和蛋白网络通路.结果显示,牛GDF8蛋白与人和小鼠具有相似的保守结构域,不稳定指数85.52,属于不稳定蛋白,其亲水性氨基酸明显多于疏水性氨基酸,为亲水性蛋白;牛GDF8蛋白在内质网分布的概率44.4%,在线粒体分布的概率33.3%,二级结构以无规则卷曲为主,折叠缠绕后形成三级结构;牛GDF8蛋白PPI网络图有11个节点,其KEGG通路主要与骨骼肌纤维发育、活化素受体信号通路、成肌细胞融合等相关.综上,推测GDF8蛋白存在于内质网和线粒体中,通过与亲水性蛋白结合调节机体生物学功能.
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