科研产出
家蚕G蛋白γ亚基BmGγ30A的克隆及其原核表达
《中国蚕业 》 2011
摘要：异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究G蛋白在家蚕中的生理功能及其作用机理,运用生物信息学方法预测到家蚕Gγ的一段序列,通过设计特异性引物、PCR和RACE技术,克隆得到家蚕Gγ30A的序列。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+),并导入E.coli BI21宿主菌中进行诱导表达。家蚕Gγ30A重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量约38 KDa处,出现特异性蛋白条带,表达方式分析发现融合蛋白在上清和包涵体中均有表达;试验结果说明我们已成功克隆到家蚕Gγ30A基因(GeneBank登录号:HQ699664),并在E.coli BL21中高效表达。
关键词： 家蚕 G蛋白γ亚基 克隆 BmGγ30A基因 原核表达
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家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的克隆及序列分析与融合表达
《蚕业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：异三聚体G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到细胞内的重要分子,参与生物体内广泛的信号转导途径。采用生物信息学方法和RT-PCR、RACE技术克隆了家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的全长cDNA序列,该序列全长1374 bp,开放阅读框(ORF)1 128 bp,编码375个氨基酸。将构建的表达载体pET-41b(+)-Gα12转化E.coli BL21宿主菌进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测显示,BmGα12可在E.coli BL21中高效表达,GST-BmGα12融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量约71 kD。系统进化分析显示BmGα12与大鼠和人Gα12/Gα13的亲缘关系较近,初步推测BmGα12介导的信号传导同样在细胞生长、胚胎发育中起重要作用。
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家蚕抗菌肽基因Cecropin-D的克隆及其真核表达载体的构建
《北方蚕业 》 2010
摘要：从家蚕中提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,获得了家蚕Cecropin-D基因编码区的cDNA,扩增出家蚕抗茵肽Cecropin-D成熟肽基因片段,重组克隆入pMD18-Tvector载体,经DNA测序,该基因为186bp,编码62个氨基酸。用限制性内切酶切下目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建真核表达栽体pPlC9K-CD。本实验的研究为获得超量表达的高活性表达抗菌肽Cecropin-D以及为研制具有抗菌活性的新型基因药物奠定了基础。
关键词： 家蚕 抗菌肽 Cecropin-D 克隆 表达栽体pPIC9K
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优质蚕种生产的配套技术研究
《北方蚕业 》 2009
摘要：从饲料、催青、原蚕饲育环境、上簇及簇中保护、种茧保护、采种、蚕种保护、蚕种浴消、防病防微等方面系统总结了优质蚕种生产的配套技术措施。
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安徽省蜂群春季饲养管理技术
《安徽农业科学 》 2009 北大核心
摘要：首先介绍了安徽省蜂业资源的研究现状及特点,并就省情分析了安徽省蜂群春季管理的重要意义,最后重点阐述了安徽省蜂群春季饲养管理技术。
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丝胶蛋白粉的制备及其物理性质初探
《中国农学通报 》 2008 北大核心
摘要：分别采用冷冻法、酸析法、有机溶剂法和化学混凝法等方法提取丝胶蛋白并制备丝胶蛋白粉,测定并比较它们的物理特性。结果表明:冷冻法提取丝胶蛋白的回收较高;无水乙醇法结合离心法制出的丝胶蛋白粉物理性质良好,其持水性、持油性和溶解性都好于其它方法制备的丝胶蛋白粉,表现出良好的加工性能。
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