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家蚕G蛋白γ亚基BmGγ30A的克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 章玉萍 1 ; 范涛 1 ; 蒋剑豪 2 ; 代君君 1 ; 王储炎 1 ; 吴传华 1 ; 田善富 1 ; 肖林珍 1 ; 樊美珍 3 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院蚕桑研究所

2.中国科学院上海生命科学院植物牛理生态研究所

3.安徽农业大学微生物防治重点实验室

关键词： 家蚕;G蛋白γ亚基;克隆;BmGγ30A基因;原核表达

期刊名称： 中国蚕业

ISSN： 1007-0982

年卷期： 2011 年 32 卷 01 期

页码： 8-14

摘要： 异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究G蛋白在家蚕中的生理功能及其作用机理,运用生物信息学方法预测到家蚕Gγ的一段序列,通过设计特异性引物、PCR和RACE技术,克隆得到家蚕Gγ30A的序列。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+),并导入E.coli BI21宿主菌中进行诱导表达。家蚕Gγ30A重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量约38 KDa处,出现特异性蛋白条带,表达方式分析发现融合蛋白在上清和包涵体中均有表达;试验结果说明我们已成功克隆到家蚕Gγ30A基因(GeneBank登录号:HQ699664),并在E.coli BL21中高效表达。

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