鸡MHCⅠ类分子克隆及其二聚体融合基因的构建与表达

戴银; 程宝艳; 胡晓苗; 王骏俊; 陈芳芳; 《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心

摘要：为进一步研究MHCⅠ类分子作用机制,以及为制备MHCⅠ基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHCⅠβ2m-α融合基因进行原核表达。运用RT-PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m链基因,并通过编码连接肽(Gly4Ser)4的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHCⅠβ2m-α重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物。结果表明,成功克隆了MHCⅠα和β2m链基因,长度分别为1014和300 bp;构建的融合基因MHCⅠβ2m-α长度为1194 bp,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性。

关键词： 鸡MHCⅠα链 鸡MHCⅠβ2m链 融合蛋白

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多黏芽孢杆菌液态发酵条件的初步研究

胡飞; 周子燕; 李昌春; 胡本进; 徐丽娜; 《安徽农业科学 》 2011 北大核心

摘要：[目的]优化多黏芽孢杆菌(Paenibacilus polymyxa)液态发酵的条件。[方法]在单因素试验基础上,采用正交试验对多黏芽孢杆菌液态发酵培养条件进行优化。[结果]确定的最佳培养基配方和培养条件为:马铃薯250.0 g/L,白砂糖20.0 g/L,玉米粉30.0 g/L,NaNO3 1.0 g/L,(NH4)2SO4 1.5 g/L,KH2PO4 1.0 g/L,pH6.5,装液量100 ml/250 ml(V/V),接种量5%(V/V),培养温度37℃,摇床转速150 r/min,培养周期72 h。[结论]该研究可为工业化生产多黏芽孢杆菌提供参考。

关键词： 多黏芽孢杆菌 发酵 培养基

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哺乳动物N-糖基化途径中关键酶唾液酸合酶和CMP-唾液酸合成酶基因在转基因家蚕中的表达

汪泰初; 李瑞雪; 郭秋红; 谭安江; 《昆虫学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：对昆虫的N-糖基化途径进行修饰改变是扩展昆虫蛋白表达系统应用范围的重要途径。本研究利用基于piggyBac转座子的家蚕Bombyx mori转基因技术表达昆虫所缺乏的哺乳类糖基化途径中的关键基因,构建了可以同时表达小鼠Mus musculus唾液酸合酶和小鼠CMP-唾液酸合成酶两个基因的piggyBac表达载体,选用家蚕肌动蛋白A3启动子控制基因的表达,并导入3×P3启动子控制下的增强绿色荧光蛋白EGFP作为分子标记。在得到的G1代转基因家蚕中对转入的基因进行了分子水平的鉴定和分析,为在家蚕这种模式昆虫中模拟哺乳类糖基化途径奠定了基础。

关键词： 糖蛋白 N-糖基化途径 家蚕 转基因 唾液酸合酶 CMP-唾液酸合成酶

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枣ISSR反应体系的建立及其指纹图谱构建

孙雯雯; 孙俊; 周军永; 孙其宝; 《安徽农业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：对影响枣ISSR反应的相关因子进行了研究。优化的反应体系包含:2.5μL 10×buffer,50 ng模板DNA,2.5 mmol.L-1 Mg2+,0.3 mmol.L-1 dNTPs,0.3μmol.L-1引物,2 U Taq DNA聚合酶,反应体积为25μL;优化的PCR扩增程序为:94℃2 min;94℃l min,退火1 min,72℃2 min,循环35次;72℃延伸10 min;退火温度根据引物温度设定。该ISSR体系被用于17个枣栽培品种遗传图谱分析,结果表明所构建的遗传图谱能较好地反应供试品种的遗传多样性。

关键词： 枣 ISSR-PCR 遗传多样性

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协同进化理论及其在施肥模型中的应用

郑高伟; 李淼; 高会议; 李录久; 《计算机应用 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：采用数理统计方法进行施肥模型构造,由于受到固定的数学结构的限制,导致有一些实验结果因不能被模型拟合而被舍弃,造成了一些数据的浪费。针对这些问题,提出了基于协同进化理论的施肥模型构建算法,将模型构建问题分解为模型结构构建与模型参数优化两个子问题,并将这两个子问题抽象成多种群间协同进化。使用遗传规划算法进行模型结构构建,使用遗传算法对模型参数进行优化,两个过程协同进行。实验结果表明,该算法能够在历史实验数据的基础上自动生成动态模型,同时具有较好的准确度。

关键词： 协同进化 遗传规划 遗传算法 施肥模型 适应度函数

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金黄色葡萄球菌乳房炎奶牛血浆的比较蛋白质组研究

杨永新; 曹随忠; 张勇; 程广龙; 赵辉玲; 赵兴绪; 《农业生物技术学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：为了分析金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)自然感染引起的隐性乳房炎奶牛血浆蛋白的表达变化,经细菌培养分离鉴定了乳中金黄色葡萄球菌,选择其感染的奶牛。采用二维凝胶电泳技术分离了临床健康奶牛和乳房炎奶牛的血浆蛋白,考马斯亮蓝G-250染色后PDQuest8.0软件检测差异表达蛋白点,高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。结果发现,金黄色葡萄球菌乳房炎奶牛血浆中有10个蛋白点的表达量发生改变,其中6个蛋白点经质谱鉴定为结合珠蛋白、转甲状腺素蛋白和α1酸性糖蛋白等4种蛋白。金黄色葡萄球菌感染可造成奶牛血浆结合珠蛋白、α1酸性糖蛋白和血清淀粉样蛋白A的表达量增加。ELISA法测定血浆结合珠蛋白的结果也发现,金黄色葡萄球菌感染奶牛血浆结合珠蛋白水平显著高于健康牛(P<0.01)。结果提示乳房炎奶牛血浆蛋白的变化可为揭示金黄色葡萄球菌感染乳腺炎症的应答提供依据。

关键词： 奶牛 乳房炎 金黄色葡萄球菌 血浆 蛋白质组

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蚕蛹新食品资源开发利用的几个关键问题

高峰林; 叶崇军; 陈复生; 《安徽农业科学 》 2011 北大核心

摘要：指出蚕蛹资源开发利用存在的问题,并对解决问题的关键提出可供参考的思路。

关键词： 蚕蛹 食品资源 开发利用

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麦稻轮作制下磷肥·钾肥合理分配技术研究

魏文; 武际; 张祥明; 郭熙盛; 《安徽农业科学 》 2011 北大核心

摘要：[目的]探讨小麦—水稻轮作制中磷肥、钾肥合理分配技术。[方法]采用田间磷钾分配运筹试验,研究在轮作周期内磷、钾肥总用量不变的前提下,磷钾不同分配比例对小麦、水稻产量构成因素及产量的影响。[结果]小麦季、水稻季以及整个轮作周期作物总产量均以处理⑤(小麦季磷钾肥用量分别占轮作周期总用量的70%和30%,水稻季磷钾肥用量分别占轮作周期总用量的30%和70%)产量最高,而麦季不施磷、稻季不施钾的处理②产量最低。小麦季不施用磷肥导致小麦有效穗数大幅度降低是小麦显著减产的主要原因。水稻季不施钾肥使穗粒数降低是水稻显著减产的重要因素。[结论]在保证整个轮作周期磷、钾肥总量一定时,可以将磷肥重施于小麦季,而钾肥可以主要施于水稻季。

关键词： 麦稻轮作 磷肥 钾肥 合理分配

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安徽鸡传染性贫血感染的血清学调查

胡晓苗; 张丹俊; 赵瑞宏; 戴银; 潘孝成; 朱传明; 姚尚祥; 刘鹏义; 《中国兽医杂志 》 2011 北大核心

摘要：鸡传染性贫血又称蓝翅病、出血性综合征、贫血性皮炎综合征,是由鸡贫血病毒引起的雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血为特征的一种免疫抑制性疾病。病毒学和血清学调查结果显示,CAV广泛存在于我国各地的部分鸡群中[1-5],是造成我国许多鸡群生产性能较低的重要原因之一[6-8]。为了解鸡传染性贫血在安徽省主要养鸡地区的流行情况,我们对安徽省主要养鸡地区鸡传染性贫血进行了一次血清学调查。

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稻种经集装箱海运到安哥拉后发芽能力的研究

杨前进; 张德文; 尤铁龙; 曹永亮; 马建峰; 《安徽农业科学 》 2011 北大核心

摘要：安哥拉政府非常重视发展农业生产,委托中国企业帮助其建设规模化、现代化的示范农场,所以需要从中国引进水稻等农作物种子到安哥拉进行试种、示范。对从中国将稻种经集装箱海运到安哥拉后的实际发芽能力进行研究,结果表明6个供试品种的发芽率和成秧率基本正常,发芽率变幅为75.7%~95.7%,成秧率变幅为25.0%~50.8%。由此可知,可以将稻种在自然温度条件下从中国用集装箱装载经海洋运输到安哥拉。

关键词： 稻种 海洋运输 安哥拉 发芽能力

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