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鸡MHCⅠ类分子克隆及其二聚体融合基因的构建与表达

文献类型: 中文期刊

作者: 戴银 1 ; 程宝艳 1 ; 胡晓苗 1 ; 王骏俊 2 ; 陈芳芳 3 ;

作者机构: 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

2.安徽省农业科学院

3.安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室

关键词: 鸡MHCⅠα链;鸡MHCⅠβ2m链;融合蛋白

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2011 年 38 卷 03 期

页码: 63-66

收录情况: 北大核心

摘要: 为进一步研究MHCⅠ类分子作用机制,以及为制备MHCⅠ基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHCⅠβ2m-α融合基因进行原核表达。运用RT-PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m链基因,并通过编码连接肽(Gly4Ser)4的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHCⅠβ2m-α重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物。结果表明,成功克隆了MHCⅠα和β2m链基因,长度分别为1014和300 bp;构建的融合基因MHCⅠβ2m-α长度为1194 bp,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性。

  • 相关文献

[1]鸡MHC Ⅰ类分子克隆及其二聚体融合. 戴银,程宝艳,胡晓苗,王骏俊,陈芳芳,余为一. 2011

[2]鸡γ-干扰素与新城疫病毒F蛋白抗原表位融合基因的构建与表达. 刘雪兰,戴银,程宝艳,彭明义,王骏俊,余为一. 2010

[3]家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的克隆及序列分析与融合表达. 章玉萍,蒋剑豪,赵云坡,汤强,代君君,王储炎,吴传华,范涛,苗雪霞. 2011

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