文献类型: 中文期刊
作者: 戴银 1 ; 程宝艳 1 ; 胡晓苗 1 ; 王骏俊 2 ; 陈芳芳 3 ;
作者机构: 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
2.安徽省农业科学院
3.安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室
关键词: 鸡MHCⅠα链;鸡MHCⅠβ2m链;融合蛋白
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2011 年 38 卷 03 期
页码: 63-66
收录情况: 北大核心
摘要: 为进一步研究MHCⅠ类分子作用机制,以及为制备MHCⅠ基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHCⅠβ2m-α融合基因进行原核表达。运用RT-PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m链基因,并通过编码连接肽(Gly4Ser)4的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHCⅠβ2m-α重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物。结果表明,成功克隆了MHCⅠα和β2m链基因,长度分别为1014和300 bp;构建的融合基因MHCⅠβ2m-α长度为1194 bp,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性。
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