科研产出
猪流行性腹泻病毒N-E.coli OmpA融合基因构建、表达及其免疫原性评价
《养猪 》 2022
摘要：为获得免疫原性更强的猪流行性腹泻病毒（PEDV）结构蛋白，试验将PEDV N蛋白基因和大肠杆菌（E.coli）OmpA蛋白基因进行融合，采用柔性linker联接，得到OmpA-linkerPEDV N融合基因，并克隆至pCold I质粒，构建重组质粒p Cold I-OmpA-linker-PEDV N。重组质粒转入BL21感受态细胞，SDS-PAGE分析重组质粒的表达，并对其编码的融合蛋白进行二级和三级结构预测。Western-blot和ELISA分析融合蛋白的免疫原性。结果表明：构建了融合基因表达质粒pCold I-OmpA-linker-PEDV N，表达了约88 ku的融合蛋白；融合蛋白的二级结构未发生明显变化，三级结构预测可折叠为正确的空间构像。该融合蛋白同时具有PEDV N蛋白和OmpA蛋白的免疫原性，并且其免疫原性显著高于单一PEDV N蛋白。说明试验获得了免疫原性较好的融合基因表达蛋白，可以为PEDV N蛋白功能研究、特异性抗体制备以及PEDV亚单位疫苗的研制提供材料和研究基础。
关键词： PEDV N基因 E.coli OmpA基因 基因融合 基因表达 免疫原性
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地顶孢霉培养物对奶牛泌乳性能、血清生化和抗氧化指标及乳脂肪酸组成的影响
《动物营养学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究地顶孢霉培养物对奶牛泌乳性能、血清生化和抗氧化指标及乳脂肪酸组成的影响。采用完全随机区组设计，将36头中国荷斯坦奶牛按照泌乳天数、胎次、产奶量相近的原则随机分为3组，每组12头奶牛。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中分别添加30和60 g/（d·头）的地顶孢霉培养物。试验期共8周，其中预试期1周，正试期7周。结果表明：1)饲粮添加地顶孢霉培养物对奶牛产奶量及乳成分无显著影响（P>0.05）。2)与对照组相比，试验第4周，饲粮添加30 g/（d·头）地顶孢霉培养物显著提高了血清总抗氧化能力（T-AOC）（P <0.05），对其他血清指标无显著影响（P> 0.05）；试验第8周，饲粮添加30 g/（d·头）地顶孢霉培养物显著提高了血清T-AOC（P <0.05），显著降低了血清丙二醛（MDA）含量（P=0.05），对其他血清指标无显著影响（P>0.05）。3)与对照组相比，试验第8周，饲粮添加30和60 g/（d·头）地顶孢霉培养物显著降低了乳中C16∶0含量（P<0.05），有降低乳中C14∶1含量的趋势（P=0.09），对乳中其他脂肪酸含量无显著影响（P>0.05）；此外，饲粮添加30 g/（d·头）地顶孢霉培养物有降低乳中≤C16脂肪酸及提高乳中>C16脂肪酸含量的趋势（P=0.08）。综上所述，饲粮添加地顶孢霉培养物对奶牛产奶量及乳成分没有显著影响，但可提高奶牛的抗氧化能力，改善乳脂肪酸组成及奶牛的健康状况。本试验条件下，奶牛饲粮中地顶孢霉培养物的适宜添加水平为30 g/（d·头）。
关键词： 地顶孢霉培养物 奶牛 泌乳性能 生化 抗氧化 乳脂肪酸
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农村生活污水贝类净化区细菌群落结构解析
《安徽农业科学 》 2022
摘要：[目的]研究农村生活污水贝类净化区的细菌群落结构.[方法]采用Illumina-MiSeq高通量测序技术对贝类处理单元水体及贝类样品进行细菌多样性分析.[结果]贝类样品中的细菌群落多样性和丰度均显著高于处理单元水体.4组样品中均有大量序列不能被归入已知的属,在门的分类水平上,优势菌门是蓝细菌门(Cyanobacteria)和放线菌门(Actinobacteriota);在属水平上,优势细菌属主要为Cyanobium_PCC_6307、hgc I_clade.菌群分析发现贝类处理单元水体可能处于富营养化进程中.水质检测分析发现贝类通过滤食作用对氨氮、总磷和COD的去除率分别达到39.75%、37.21%、59.52%.[结论]该研究为贝类净水技术提供基础数据,对贝类处理农村生活污水系统的构建具有指导意义.
关键词： 农村生活污水 淡水贝类 净化区 高通量测序 群落结构 细菌多样性
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中华绒螯蟹4个养殖群体遗传多样性与遗传结构分析
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：分析中华绒螯蟹养殖群体的遗传多样性和遗传结构,可为中华绒螯蟹的遗传改良及新品种培育提供科学依据.研究采用微卫星标记对偶数年江苏、安徽4个主要养殖群体的遗传特征进行分析.10个微卫星位点在4个群体中均表现出高度的遗传多样性,有效等位基因数(Ne)为9.810~11.660、预期杂合度(He)为0.904~0.918、多态信息含量(PIC)为0.874~0.891.综合遗传多样性大小为无为群体>张家港群体>高淳群体>宜兴群体;成对群体间的遗传距离较小(<0.3)、遗传分化指数(<0.05)均较低,分子变异分析中高达99.58%遗传变异来自群体内;结构分析显示,所有个体可分为4个遗传组,但每个养殖群体中均包含4个遗传组.群体系统进化树显示,高淳和张家港群体最先聚类为一支,互为姊妹群,然后依次与无为群体、宜兴群体聚类.中华绒螯蟹4个养殖群体遗传多样性水平高,群体间无显著遗传分化,群体间可能存在种质混杂.
关键词： 中华绒螯蟹 遗传多样性 微卫星 养殖群体 遗传结构
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石榴HAK/KUP/KT家族基因鉴定及钾转运功能分析
《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：从石榴基因组中鉴定出18个编码689~837个氨基酸的HAK/KUP/KT家族基因;启动子区含有多个与逆境胁迫相关的调控元件,编码蛋白中均含有一段K+转运结构域(GVVYGDLGTSPLY);系统进化分析表明,石榴、拟南芥、葡萄和梨的HAK/KUP/KT家族基因均可分为4个簇(Ⅰ~Ⅳ).RNA-seq分析发现簇Ⅱ和簇Ⅲ的多数基因在石榴不同组织中均有表达,簇Ⅰ中PgrHAK5仅在根中特异性表达.qRT-PCR分析发现,PgrHAK5在石榴根中有特异性高表达,其表达受缺钾胁迫的诱导.亚细胞定位表明PgrHAK5定位于细胞质膜上.酵母功能互补试验表明,PgrHAK5具有转运K+的功能,推测定位于质膜上的PgrHAK5参与石榴根系K+的跨质膜转运.
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鸡白痢沙门菌感染雏鸡的骨髓miRNA表达谱分析
《畜牧兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：旨在探究鸡白痢沙门菌（Salmonella enterica serovar Pullorum,S. Pullorum）感染雏鸡后骨髓miRNA的差异表达特征，为深入了解鸡白痢沙门菌的致病机制提供理论基础。将7日龄SPF雏鸡随机分为两组，分别口服鸡白痢沙门菌和PBS,于感染24 h后采集骨髓进行miRNA测序，筛选差异倍数≥2且P值≤0.05的差异表达miRNAs进行靶基因预测以及GO、KEGG富集分析，随机选取6个miRNAs进行qRT-PCR验证，构建与免疫过程相关的miRNA-mRNA靶点网络。通过miRNA测序，共获得20个已知的差异表达miRNAs,其中11个上调，9个下调。qRT-PCR结果表明，miRNA变化趋势与测序结果一致。GO分析结果表明，差异表达基因主要富集在膜运输、信号转导、免疫系统、碳水化合物代谢、糖类的生物合成和代谢等，KEGG的信号通路主要富集在Notch信号通路、Hedgehog信号通路、PPAR信号通路、AMPK信号通路、Hippo信号通路等，miRNA-mRNA网络互作发现，gga-miR-1466和gga-miR-6643-5p可能是参与免疫过程相关的关键miRNA。本研究解析了鸡白痢沙门菌感染雏鸡的骨髓miRNA表达谱特征，为了解鸡白痢沙门菌和鸡之间相互作用的复杂分子致病机制提供了新的见解，为防控鸡白痢沙门菌感染提供了新策略。
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皖南单季稻区种植利用紫云英对水稻产量、氮肥利用率及稻米品质的影响
《中国土壤与肥料 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了探明种植利用紫云英在稻田系统的化学氮肥替代潜力,通过4年田间定位试验,设置冬闲+不施氮(-N)、冬闲+100%N(100%N)、紫云英+不施氮(GM)、紫云英+40%氮肥(GM+40%N)、紫云英+60%氮肥(GM+60%N)和紫云英+80%氮肥(GM+80%N)共6个处理,研究不同处理对水稻产量、氮素吸收、氮肥利用率和品质的影响.结果表明,GM+80%N处理水稻产量、氮素积累量、糙米率、整精米率、垩白粒率、蛋白质和锌含量与100%N处理差异不显著,氮肥利用率、精米率、钙、镁和铁含量显著高于100%N处理(P<0.05),垩白度和直链淀粉含量显著低于100%N处理(P<0.05);GM+60%N处理水稻产量、糙米率、整精米率、垩白粒率、垩白度和锌含量与100%N处理差异不显著,氮肥利用率、精米率、钙、镁和铁含量显著高于100%N处理(P<0.05),氮素积累量、直链淀粉和蛋白质含量显著低于100%N处理(P<0.05).GM+60%N处理水稻产量、氮素积累量、糙米率、精米率、整精米率、垩白粒率、直链淀粉、蛋白质、钙、镁、铁和锌含量与GM+80%N处理差异不显著,但氮肥利用率低于GM+80%N处理.综上所述,在紫云英翻压还田的基础上,水稻季氮肥减施40%比较适宜,且有利于水稻节肥增效并获得优质稻米.
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