科研产出
家蚕抗菌肽Cecropin D基因的原核表达、纯化及抑菌活性测定
《中国蚕业 》 2011
摘要：根据在家蚕品系菁松和菁松近等基因系添食家蚕浓核病病毒(BmDNV)前后差异表达的抗菌肽Cecropin D,构建重组表达载体pET-41b-CecD,将测序正确的载体转化到E.coli BL21菌株中进行诱导表达,并对诱导条件进行优化。诱导产物用蛋白质印迹(western blot)进行验证。可溶性分析发现谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合抗菌肽部分可溶,部分在表达过程中形成包涵体。GST亲和层析纯化后,分别检测重组抗菌肽的抗菌活性,结果表明:纯化后的重组抗菌肽可以很好地抑制并杀灭细菌,其效果与抗生素卡那霉素相似。
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春用家蚕品种681×682的育成
《蚕业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了选育能通过对交种幼虫斑纹及蛾色识别提高杂交率的强健性多丝量春用家蚕品种,根据家蚕暗化型基因(mln)的遗传规律,将mln导入实用家蚕品种,培育出中系强健性灰黑蛾品种681。将681与普通日系白蛾品种682(由现行品种皖6经强健性及繁育系数改良而来)组配成杂交组合,实现了蚕种繁育中可利用对交品种的蛾色差异,将杂交率提高到99%以上的目的。新品种还具有强健好养、易繁育、眠起齐、丝质优的特点,在安徽省农村饲养鉴定的茧丝长1 401.0 m,解舒率76.16%,解舒丝长1 068.0 m,茧丝纤度3.126 dtex,洁净94.19分。新品种于2010年12月通过安徽省家蚕新品种审定。
关键词： 家蚕 春用品种 681×682 暗化型 灰黑蛾 杂交率
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家蚕G蛋白γ亚基BmGγ30A的克隆及其原核表达
《中国蚕业 》 2011
摘要：异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究G蛋白在家蚕中的生理功能及其作用机理,运用生物信息学方法预测到家蚕Gγ的一段序列,通过设计特异性引物、PCR和RACE技术,克隆得到家蚕Gγ30A的序列。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+),并导入E.coli BI21宿主菌中进行诱导表达。家蚕Gγ30A重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量约38 KDa处,出现特异性蛋白条带,表达方式分析发现融合蛋白在上清和包涵体中均有表达;试验结果说明我们已成功克隆到家蚕Gγ30A基因(GeneBank登录号:HQ699664),并在E.coli BL21中高效表达。
关键词： 家蚕 G蛋白γ亚基 克隆 BmGγ30A基因 原核表达
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家蚕抗菌肽基因Cecropin-D的克隆及其真核表达载体的构建
《北方蚕业 》 2010
摘要：从家蚕中提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,获得了家蚕Cecropin-D基因编码区的cDNA,扩增出家蚕抗茵肽Cecropin-D成熟肽基因片段,重组克隆入pMD18-Tvector载体,经DNA测序,该基因为186bp,编码62个氨基酸。用限制性内切酶切下目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建真核表达栽体pPlC9K-CD。本实验的研究为获得超量表达的高活性表达抗菌肽Cecropin-D以及为研制具有抗菌活性的新型基因药物奠定了基础。
关键词： 家蚕 抗菌肽 Cecropin-D 克隆 表达栽体pPIC9K
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家蚕神经肽促前胸腺激素基因mRNA的发育表达
《安徽农业科学 》 2010 北大核心
摘要：[目的]研究家蚕神经肽促前胸腺激素基因mRNA的发育表达。[方法]采用荧光定量PCR方法,研究家蚕5龄幼虫、预蛹期、蛹期和成虫4个阶段脑—咽下神经节复合体中PTTH基因的mRNA表达量变化。[结果]5龄幼虫PTTH基因mRNA表达量高于预蛹期、蛹期和成虫3个阶段;5龄第6天PTTH基因mRNA表达量最高,蛹期4～8d时持续维持较高表达水平,化蛾前表达量又有所降低,成虫表达量最低。[结论]家蚕PTTH基因mRNA的发育表达变化可能与其调控蜕皮激素合成的功能有关。
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