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砀山酥梨多酚氧化酶基因(PbPPO)的原核表达及优化研究

文献类型： 中文期刊

作者： 常艳 1 ; 刘晓峰 1 ; 金青 1 ; 蔡永萍 1 ; 聂凡 2 ; 林毅 1 ;

作者机构： 1.安徽农业大学生命科学学院

2.安徽省农业科学院园艺研究所

关键词： 厚砀山酥梨;木质素;石细胞;多酚氧化酶;原核表达

期刊名称： 亚热带植物科学

ISSN： 1009-7791

年卷期： 2017 年 46 卷 03 期

页码： 209-214

摘要： 从砀山酥梨Pyrus bretschneideri ‘Dangshan Su’果实中克隆得到一条多酚氧化酶基因(PbPPO)的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF809859)。通过生物信息学分析表明,PbPPO基因CDS区全长1782 bp,编码593个氨基酸,氨基酸序列由N端叶绿体转运肽、Cu结合区与C端疏水区三部分组成。为进一步研究Pb PPO基因的功能,成功构建其原核表达载体pET-28a-PbPPO,并在大肠杆菌Rosetta菌株中成功诱导表达,经优化后显示,在28℃、1.0 mmol·L~(-1) IPTG诱导5 h的条件下,融合蛋白表达量最高。

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