科研产出
淮南麻黄鸡MHCⅠα链基因的克隆及序列分析
《动物医学进展 》 2015 北大核心 CSCD
摘要:典型的主要组织相容性复合体(MHC)是抗原递呈的关键分子,具有重要的免疫功能,与多种疾病密切相关。为深入了解地方品种鸡MHCⅠ类α分子的特征,尤其是抗原结合区域的特点,通过RT-PCR技术获得了29个淮南麻黄鸡完整的α链基因,并进行了分析。结果显示,淮南麻黄鸡MHCⅠα分子高度多态,但主要集中在α1和α2区域,该区变异氨基酸位点共68个,其中高度变异22个。淮南麻黄鸡MHCⅠ分子α1和α2区域氨基酸序列同源性介于79.3%~99.5%之间,仅少部分序列完全一致。鸡氨基酸序列同源性与鸭较高,介于57.6%~64.1%之间;其次为人和鼠。进化分析显示,淮南麻黄鸡MHCⅠ分子α1和α2区域分属于两个类群,但未显示明显的品种差异。此外,鸡与鸭的亲缘关系较近,与其他物种则遗传距离较远。研究结果表明,淮南麻黄鸡MHC分子在进化过程中呈现高度的多态性,但受到病原体的选择压力,多态性主要位于抗原肽结合部分的α1和α2区域。
安徽进口鸡群禽白血病感染状况的调查
《检验检疫学刊 》 2014
摘要:[目的]了解禽白血病病毒在安徽辖区进口鸡群中的感染情况。[方法]随机采集1日龄胎粪、不同日龄段泄殖腔棉拭子检测禽白血病病毒群特异性p27抗原、采集血清检测ALV-AB及J亚型抗体,收集种蛋检测蛋清p27抗原。[结果]祖代蛋鸡1日龄胎粪和200日龄泄殖腔棉拭子p27抗原的阳性率分别为18.2%、45%、4.5%、15%;种蛋蛋清p27抗原全为阴性,父母代蛋鸡180日龄泄殖腔棉拭子和种蛋清p27抗原的阳性率分别为21.9%、10%;祖代和父母代蛋鸡ALV-J抗体全为阴性,ALV-AB抗体阳性率分别为9%、10%、28.1%。祖代肉鸡泄殖腔棉拭子p27抗原阳性率分别为5%、6.7%、3.3%,种蛋蛋清p27抗原全为阴性;哈伯德鸡群ALV-J抗体为阴性,AA鸡群ALV-J抗体阳性率为20%;两个品种不同日龄肉鸡ALV-AB抗体的阳性率分别为32.5%、63.3%、80%。[结论]安徽进口鸡群中ALV-J仅AA鸡群有20%的感染率,ALV-AB的感染率分别为9%、10%、28.1%、32.5%、63.3%、80%。
猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
《养猪 》 2014
摘要:根据Gen Bank登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株(登录号KJ960180)的M基因保守序列,设计1对扩增片段大小为299 bp的特异性引物,经PCR扩增、克隆、测序鉴定后,提取质粒作为阳性标准品,建立了PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法。该方法在1.21×103~1.21×108拷贝/μL范围内呈现良好的线性,相关系数(R2)为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线为单个特异峰,产物Tm值为85.5~86℃,最低检测限为1.21×101拷贝/μL。本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、重复性好、成本低且操作简单,适用于PEDV的早期诊断、定量研究和流行病学监测。
关键词: 猪流行性腹泻病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量RT-PCR
鸡主要组织相容性复合体Ⅰβ微球蛋白(β2m)基因的克隆及序列分析
《中国畜牧兽医 》 2014 北大核心
摘要:为深入了解鸡主要组织相容性复合体Ⅰ(major histocompatibility complex classⅠ,MHCⅠ)β微球蛋白(β2m)分子的特征,研究β2m的免疫作用机理,试验通过RT-PCR技术获得了15条3个地方品种鸡完整的典型的MHCⅠβ2 m基因,将该序列与GenBank数据库中登录的鸭、人、鼠、鱼、猴、马和猪7个不同物种的MHCⅠβ2m分子序列进行了比对分析。结果显示,15条鸡β2m氨基酸序列同源性在98.0%~100%之间,大部分序列完全一致。鸡β2m氨基酸序列与鸭同源性最高,为60.6%;最低的则是来源于草鱼的β2m氨基酸序列,仅为33.3%。遗传进化分析进一步证实鸡与鸭的MHCⅠβ2m亲缘关系较近,与其他物种则遗传距离较远。此外,序列分析发现鸡β2 m基因高度保守,仅个别碱基发生突变。其成熟肽序列的第24和79位为半胱氨酸,在所比对的动物中均未发生突变;同时在成熟肽的第77~83位之间存在免疫球蛋白超基因家族的特征基序"YXCXVXH"。研究结果表明,鸡与其他物种的MHCⅠβ2m分子具有相同的免疫功能基本单位,同时又具备独特的结构特点。
关键词: 鸡主要组织相容性复合体 β微球蛋白基因 序列分析
不同水平棉籽粕、储存温度和时间对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响
《畜牧与兽医 》 2014 北大核心
摘要:选用31周龄、40周龄"京红"、"京粉"蛋鸡,分2个阶段研究不同棉籽粕含量日粮以及鸡蛋的储存温度和时间对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响。第一阶段(正试期6周)分别在蛋鸡日粮中添加5%、9%和12%的棉籽粕;第二阶段(正试期6周)分别添加25%和30%的棉籽粕。每两周收集鸡蛋测定蛋品质并在不同温度环境下(室温、4℃、0℃和-10℃)储存一定的时间,煮熟后测定蛋黄强度。研究结果表明低量(≤12%)添加棉籽粕对两个品种蛋鸡生产性能无明显影响(P>0.05),高量(≥25%)添加时"京粉"产蛋率显著下降(P<0.05),对蛋重无明显影响,对"京红"产蛋率和蛋重均无明显影响(P>0.05);日粮中棉籽粕含量对蛋品质无明显影响(P>0.05);不同储存条件下各组鸡蛋蛋黄强度测定结果表明:超低温(-10℃)储存后各组蛋黄弹性明显增大,且存在品种间的显著差异(P<0.05)。
关键词: 棉籽粕 储藏温度 储藏时间 生产性能 蛋品质 弹性
不同部位接种禽流感油乳剂灭活疫苗对笼养蛋鸡血清抗体和生产性能的影响
《中国家禽 》 2014 北大核心
摘要:为了解不同部位接种禽流感油乳剂灭活疫苗对笼养蛋鸡血清抗体和生产性能的影响,比较了笼养蛋鸡颈部皮下、颈背部皮下、胸部肌肉和腿部肌肉接种疫苗后,免疫鸡群的应激反应、局部病变发生情况、30 d内的产蛋性能变化以及免疫20、50、80 d时的血清H5、H9AIV HI抗体效价。结果表明,不同部位接种疫苗均可显著提高血清抗体水平,并产生程度不等的应激反应和局部病变;其中以腿部肌肉接种产生的血清抗体水平较高且相对稳定,应激反应和对产蛋性能的影响相对较小,并具有操作方便和无需辅助保定等优点,是笼养蛋鸡较为理想的禽流感油乳剂灭活疫苗免疫接种方式。
关键词: 禽流感油乳剂灭活疫苗 免疫部位 生产性能 抗体水平
黄羽鸡J亚群禽白血病病毒的分离及gp85基因分析
《动物医学进展 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为了解禽白血病病毒在黄羽鸡中的流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清P27抗原检测、PCR扩增,对送检疑似禽白血病的黄羽鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行了测序和序列比较。结果表明,自黄羽鸡分离到2株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),分别命名为AHaq01和AHaq02,它们之间的核苷酸序列同源性为93.8%,与ALV-J参考毒株序列同源性为91.1%~99.8%,其中与ALV-J原型毒株HPRS-103的序列同源性分别为93.3%和98.1%,与分离株AHaq01和AHaq02同源性最高的分别是WN100404(95.0%)和SD09TA04(99.8%)。进化分析进一步表明,2个分离株间的亲缘关系较远,为来源不同的ALV-J毒株。