文献类型： 中文期刊
作者： 沈学怀 1 ; 潘孝成 1 ; 巩雅静 2 ; 张丹俊 1 ; 赵瑞宏 1 ; 胡小苗 1 ; 戴银 1 ; 侯红艳 1 ; 周学利 1 ; 朱传民 1 ;
作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
2.安徽农业大学动物科技学院
关键词： 猪流行性腹泻病毒;SYBR GreenⅠ;荧光定量RT-PCR
期刊名称： 养猪
ISSN： 1002-1957
年卷期： 2014 年 06 期
页码： 109-112
摘要： 根据Gen Bank登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株(登录号KJ960180)的M基因保守序列,设计1对扩增片段大小为299 bp的特异性引物,经PCR扩增、克隆、测序鉴定后,提取质粒作为阳性标准品,建立了PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法。该方法在1.21×103~1.21×108拷贝/μL范围内呈现良好的线性,相关系数(R2)为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线为单个特异峰,产物Tm值为85.5~86℃,最低检测限为1.21×101拷贝/μL。本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、重复性好、成本低且操作简单,适用于PEDV的早期诊断、定量研究和流行病学监测。
- 相关文献
[1]J亚群禽白血病SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立. 王莉,黄安宁,李槿年,张丹俊,刘雪兰. 2013
[2]雏鸡感染鸡白痢沙门菌后禽β-防御素6和鸡Toll样受体15在肠道转录与定位研究. 王燕,周秀红,祁克宗,涂健,刘红梅,潘孝成. 2014
[3]6株猪流行性腹泻病毒N基因的克隆与分析. 潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,戴银,胡晓苗,侯宏艳,周学利,张丹俊. 2019
[4]猪流行性腹泻病毒SD株的分离与鉴定. 潘孝成,赵瑞宏,沈学怀,钱坤,胡晓苗,周学利,戴银,侯宏艳,张丹俊. 2015
[5]猪流行性腹泻病毒安徽分离株N基因的克隆与表达. 潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,戴银,胡晓苗,侯宏艳,周学利,张丹俊. 2019
[6]猪流行性腹泻病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立. 芮聪杰,潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,尹磊,戴银,胡晓苗,侯宏艳,周学利,张丹俊. 2020
[7]猪流行性腹泻病毒RAA-CRISPR/Cas13a检测方法的建立与初步应用. 刘华,殷冬冬,邵颖,宋祥军,王振宇,潘孝成,涂健,何长生,朱良强,祁克宗. 2023
[8]猪流行性腹泻病毒卵黄抗体的制备与应用. 潘孝成,赵瑞宏,沈学怀,张丹俊,胡晓苗,周学利,戴银,侯宏艳,钱坤. 2016
[9]猪流行性腹泻病毒检测技术研究进展. 芮聪杰,潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,张丹俊. 2018
[10]猪流行性腹泻病毒检测技术研究进展. 芮聪杰,潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,张丹俊. 2018
作者其他论文 更多>>
-
水禽3种免疫抑制性病毒多重PCR检测方法的建立与应用
作者：戴银;杨雪;童雨芹;吴希;陈瑝儿;仲月怡;胡晓苗;王洁茹;殷冬冬;尹磊;沈学怀;潘孝成;赵瑞宏
关键词：禽流感病毒H9亚型;鹅圆环病毒;番鸭呼肠孤病毒;三重PCR
-
黟县黑猪微卫星遗传多样性分析
作者：李雪婷;董林;王重龙;刘林清;张威;苏世广;周学利;周梅
关键词：黟县黑猪;微卫星标记;遗传多样性;聚丙烯酰胺凝胶电泳
-
安徽部分地区鸡场鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体感染与垂直传播调查
作者：沈学怀;侯宏艳;赵瑞宏;尹磊;张丹俊;戴银;殷冬冬;王洁茹;胡晓苗;潘孝成;王红燕
关键词：安徽;规模鸡场;鸡毒支原体;鸡滑液囊支原体;血清学调查;垂直传播
-
1株新型鹅星状病毒的全基因序列分析
作者：赵瑞宏;胡晓苗;侯宏艳;周学利;潘孝成;戴银
关键词：新型鹅星状病毒;全基因;序列分析;组织分布
-
猪流行性腹泻病毒RAA-CRISPR/Cas13a检测方法的建立与初步应用
作者：刘华;殷冬冬;邵颖;宋祥军;王振宇;潘孝成;涂健;何长生;朱良强;祁克宗
关键词：猪流行性腹泻病毒;CRISPR/Cas13a;重组酶辅助扩增;N基因;检测
-
猪圆环病毒3型和4型TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法的建立
作者：殷冬冬;王洁茹;尹磊;沈学怀;戴银;赵瑞宏;侯宏艳;胡晓苗;王桂军;潘孝成
关键词：猪圆环病毒3型;猪圆环病毒4型;TAQMAN;实时荧光定量PCR
-
重组酶辅助扩增结合CRISPR/Cas13a检测禽腺病毒4型方法的建立
作者：殷冬冬;郭浩;兰梦蝶;尹磊;王洁茹;沈学怀;戴银;潘孝成
关键词：禽腺病毒4型;CRISPR/Cas13a;重组酶辅助扩增;检测
