五华鸡J亚群白血病病毒env部分基因的克隆和序列分析

戴银; 张丹俊; 胡晓苗; 赵瑞宏; 《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心

摘要：本试验通过PCR技术获得了安徽省地方品种五华鸡禽白血病病毒J亚群(avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)env部分基因序列ALV-J-env1,并将该序列与GenBank数据库中登录的8条env基因相应序列进行了比对分析。结果表明,五华鸡已经感染了J亚群禽白血病,且部分鸡个体已经发病。通过分析可见,ALV-J-env1与所比较的基因序列同源性介于94.2%～96.6%之间,说明不同毒株之间的env基因有一定变异。但与ALV-J-env1同源性最高的是来自于中国ALV-J毒株的HQ425636和HM235665基因序列,且在进化树中聚集为一组,暗示它们之间亲缘关系较近,由共同的毒株进化而来。与ALV-J-env1同源性最低的是来源于马来西亚毒株的AY312965基因序列,遗传进化分析也进一步证实,两者之间亲缘关系较远。

关键词： 禽白血病病毒J亚群 env部分基因 序列分析

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安徽鸡传染性贫血感染的血清学调查

胡晓苗; 张丹俊; 赵瑞宏; 戴银; 潘孝成; 朱传明; 姚尚祥; 刘鹏义; 《中国兽医杂志 》 2011 北大核心

摘要：鸡传染性贫血又称蓝翅病、出血性综合征、贫血性皮炎综合征,是由鸡贫血病毒引起的雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血为特征的一种免疫抑制性疾病。病毒学和血清学调查结果显示,CAV广泛存在于我国各地的部分鸡群中[1-5],是造成我国许多鸡群生产性能较低的重要原因之一[6-8]。为了解鸡传染性贫血在安徽省主要养鸡地区的流行情况,我们对安徽省主要养鸡地区鸡传染性贫血进行了一次血清学调查。

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发酵鸡粪中病原微生物检测方法的探讨

胡晓苗; 张丹俊; 赵瑞宏; 戴银; 潘孝成; 《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心

摘要：鸡粪发酵后作为再生饲料或有机肥已广泛使用,其中病原微生物检测尤显重要,为此本研究对发酵前后的鸡粪样品中主要病原菌大肠杆菌和沙门氏菌检测方法进行了探讨。结果表明,鸡粪样品中大肠杆菌CFU(菌落形成单位)由发酵前3.67×107个/g减少至6.33×105个/g,经发酵处理的鸡粪样品均未检出沙门氏菌,两者与发酵前样品均存在极显著差异(P<0.01),说明所建立的方法可行。

关键词： 鸡粪 发酵 大肠杆菌 沙门氏菌 检测

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鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

赵瑞宏; 张丹俊; 潘孝成; 程宝艳; 胡晓苗; 《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心

摘要：为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。

关键词： 鸭肝炎病毒R85952株 VP1基因 克隆 表达

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不同免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫黏膜及血清抗体的影响

程宝艳; 詹凯; 赵瑞宏; 胡晓苗; 潘孝成; 张丹俊; 《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心

摘要：通过不同的免疫途径对商品蛋雏鸡进行免疫,探讨不同的免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫(Newcastle disease,ND)黏膜抗体及血清抗体的影响。结果表明,同时用新城疫弱毒疫苗免疫后,不同的免疫途径产生的新城疫黏膜抗体及血清抗体效价有较大差异。采用喷雾法于3日龄首免,15日龄二免,25日龄三免,鸡体产生保护水平(6 log2)以上的ND黏膜抗体和血清抗体最快、抗体水平最高、维持时间最长、总体免疫效果最好,而采用饮水免疫的试验组产生的ND黏膜抗体和血清抗体水平均不高,总体免疫效果最差。

关键词： 新城疫 免疫途径 黏膜抗体 血清抗体 蛋雏鸡

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安徽省鸡群网状内皮组织增生症感染的血清学调查

张丹俊; 赵瑞宏; 胡晓苗; 程宝艳; 张玉晴; 靳宇田; 姚尚祥; 刘鹏义; 戴银; 詹凯; 潘孝成; 《中国兽医杂志 》 2010 北大核心

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新城疫病毒F蛋白抗原表位串联基因的构建及其原核表达

程宝艳; 彭明义; 余为一; 张丹俊; 詹凯; 《中国兽医学报 》 2010 北大核心 CSCD

摘要：用自行设计的3对引物,通过RT-PCR从接毒的SPF鸡胚的尿囊液中克隆了新城疫病毒F基因3段抗原表位区段,大小分别为81、108、105bp。应用添加互补性酶切位点的基因工程方法,将3段抗原表位基因片段拼接成多表位串联基因,大小为306bp。将此基因片段插入含组氨酸(His)基因的质粒pET-32-a中,构建了重组质粒pET-32-a-F306。经诱导表达,获得相对分子质量约为31000的融合蛋白,其中F蛋白抗原表位串联基因片段表达产物约为11000。经亲和层析,获得纯化His-F306融合蛋白,进一步用该蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗新城疫病毒F蛋白抗体。经过琼扩、ELISA及Western-blot检测,表明该融合蛋白中的抗原表位串联基因所表达的蛋白具有良好的抗原性。

关键词： 新城疫病毒 F基因 抗原表位 原核表达

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鸭链球菌的分离与耐药性监测

赵瑞宏; 张丹俊; 潘孝成; 程宝艳; 胡晓苗; 《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心

摘要：本研究利用鲜血琼脂和营养琼脂培养基,从自然发病的鸭体内成功分离出链球菌19株,革兰氏染色镜检可见革兰氏阳性球菌呈长链状排列,生化试验和动物接种试验结果表明,所分离的细菌对鸭有致病性。药敏试验结果表明,分离的菌株耐药性均很强,除7株对丁胺卡那中度敏感外,其余菌株对丁胺卡那、头孢曲松钠、氧氟沙星等14种药物低度敏感或不敏感。说明鸭链球菌耐药性在不断增强,给鸭链球菌病的防治带来了一定的困难。

关键词： 鸭 链球菌 分离 耐药性

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细菌黏附素研究进展

程宝艳; 张丹俊; 彭明义; 程帮照; 戴银; 《畜牧与饲料科学 》 2009

摘要：黏附素是细菌表面某种特定的蛋白质结构或糖脂成分,可存在于细菌的细胞壁、外膜蛋白、鞭毛、菌毛及微毛等结构中。近年来关于细菌黏附素的研究取得了一些进展,笔者主要从细菌黏附素的发现、黏附现象及其机理、主要的一些细菌黏附素与黏附素受体、细菌黏附素研究的应用等方面作一综述。

关键词： 黏附素 受体 进展

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高致病性猪蓝耳病混合感染症防控中存在的误区

张丹俊; 赵瑞宏; 胡晓苗; 程宝艳; 潘孝成; 《中国牧业通讯 》 2009

摘要：夏季,特别是进入梅雨季节后,由于气候高温高湿、饲养密度过大、饲料霉变、饲料营养水平下降等应激因素最易诱发高致病性猪蓝耳病混合感染症的发生。笔者现将高致病性猪蓝耳病混合感染症防控中常见的误区简述如下,供参考。1认识误区过分依赖疫苗免疫。很多养猪户错误的认为,只要把高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬、猪链球菌等疫苗免疫好就万事大吉了,

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