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鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 赵瑞宏 1 ; 张丹俊 1 ; 潘孝成 1 ; 程宝艳 1 ; 胡晓苗 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鸭肝炎病毒R85952株;VP1基因;克隆;表达

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2010 年 37 卷 07 期

页码： 69-72

收录情况： 北大核心

摘要： 为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。

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