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三种适用于作物遗传转化的载体构建与验证

文献类型： 会议论文

第一作者： She Maoyun

作者： She Maoyun 1 ; 佘茂云 2 ; 殷桂香 2 ; 张平治 2 ; 叶兴国 3 ;

作者机构： 1.Crop Institute,Anhui Academy of Agricultural Sciences,Hefei 230031,China

2.安徽省农业科学院作物研究所,安徽 合肥 230031

3.中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,北京 100081

关键词： 农作物;植物表达载体;遗传转化;标记基因;生物安全

会议名称： 安徽省农学会、安徽省作物学会2014年联合学术年会

主办单位： 安徽省农学会;安徽省作物学会

页码： 58-67

摘要： 为满足植物功能基因组学研究及转基因安全性需要,本研究根据一些国内外引进或商业化的植物表达载体及其相关元件,构建了3个适合于植物,尤其是单子叶植物转化的表达载体,即pAH006、pWMB022和pWMB025.pAH006载体包含由玉米泛素ubi启动子调控的GUS基因和bar基因的完整T-DNA区域,此区段能够被酶切回收,可用于单子叶植物农杆菌介导转化效率评价及基因枪介导线状DNA转化效果研究;pWMB022载体携带由双35S启动子调控的玉米色素基因Lc和C1,可用作基因枪介导的共转化筛选标记,直观筛选含目标基因转基因材料;pWMB025载体携带由ubi启动子调控的、商业化转基因植物中广泛利用的EPSPS基因,可用于禾谷类作物农杆菌或基因枪介导的遗传转化,载体多克隆位点可通过酶切方式更换目标基因.酶切鉴定结合农杆菌或基因枪介导的小麦幼胚愈伤组织或叶片转化验证此3个载体,表明,载体构建正确,其标记基因、可视化基因和报告基因均能正常表达.这3个载体的构建对于小麦等植物转化效率提升、安全型转基因作物获得和植物功能基因组学研究等具有重要意义.

分类号： S330

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