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小型西瓜SRAP技术体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 江海坤 1 ; 王明霞 1 ; 严从生 1 ; 王艳 1 ; 马绍鋆 1 ; 董言香 1 ; 方凌 1 ; 张其安 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院园艺研究所

关键词： 小型西瓜;SRAP;正交;体系优化

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2011 年 27 卷 28 期

页码： 240-244

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探讨小型西瓜种质遗传分析奠定基础以及不类型西瓜SRAP技术体系的通用性,以小型西瓜F'1秀丽'为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用Me3-Em3引物组合进行PCR扩增以确定最优反应体系;进一步应用该优化反应体系,对5个不同引物和37份不同果型西瓜资源DNA进行SRAP-PCR扩增。结果表明,小型西瓜SRAP-PCR最佳反应体系为:10×PCR buffer 2μL、Mg2+3.0mmol/L,dNTPs0.2mmol/L,引物0.5μmol/L,模板DNA 40ng、Taq聚合酶0.5U,总体积为10μL。不同果型西瓜资源DNA进行SRAP-PCR扩增,电泳条带清晰、稳定性好,说明不同果型西瓜种质SPAP体系具有通用性。

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