文献类型: 中文期刊
作者: 王明霞 1 ; 严从生 1 ; 江海坤 1 ; 马绍鋆 1 ; 方凌 1 ;
作者机构: 1.安徽省农业科学院园艺研究所
关键词: 安徽乌菜;SRAP;正交;体系优化
期刊名称: 中国瓜菜
ISSN: 1673-2871
年卷期: 2013 年 26 卷 02 期
页码: 30-32
摘要: 以合肥黄心乌为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用me3-em3引物组合进行PCR扩增以确定最佳反应体系。结果表明,安徽乌菜SRAP-PCR最佳反应体系为:10×PCR buffer 1μL,Mg2+ 3.0mmol·L-1,dNTPs 0.2mmol·L-1,引物各0.5mol·L-1,模板DNA 4.0ng·μL-1,Taq聚合酶0.05U·μL-1,总体积为10μL。利用此反应体系对安徽乌菜进行PCR扩增并电泳检测,其结果清晰、稳定、可靠,可用于安徽乌菜的遗传分析。
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