科研产出
离子束辐照对pUC18质粒DNA结构和功能影响的初步研究
《安徽农业科学 》 1994
摘要:离子束辐照pUC18质粒DNA,可以造成其DNA链的断裂。在剂量较低的情况下(5~15×1015N+/cm2),以单链断裂为主,电镜下主要呈开环结构;在相对较高的剂量下(25×1015N+/cm2),由于相对部位双链的断裂出现,电镜下可观察到线性质粒结构。经离子束辐照的质粒DNA,其转化活性(即存活率)随处理剂量的增加而降低,且LacZ基因也能发生较高频率的突变,与60Co—r射线相比,在存活率相近的情况下,突变率较高。
关键词: 离子束;辐照;DNA;转化;突变
水稻原生质体高效培养技术的研究
《安徽农业科学 》 1994
摘要:用16个基因型水稻成熟胚在MS和N6培养基上筛选建成悬浮细胞系9个,原生质体再生植株3个。使用一步法或两步法较常规的分步法缩短建成悬浮细胞系时间20~30天。使用“三合一”培养基(即N6大量元素、MS微量元素和B5有机物等)和固液双相培养法较琼脂糖包埋法及液体浅层培养法显著提高原生质体培养的植板率。
低能离子束介导外源基因进入水稻细胞的研究
《安徽农业大学学报 》 1994
摘要:用离子束介导法将编码β-葡萄糖苷酸酶的gue基因引入受体植物细胞,并实现瞬间表达。水稻悬浮细胞经离子束辐照后,电镜下能观察到细胞表面留下的溅射和刻蚀痕迹,细胞存活率随辐照剂量的增加而显著降低。将离子束(30keV,2×l015N+/cm2)处理后的水稻悬浮细胞,浸入含有gus基因外源DNA的SSC温育介质,两天后,观察到受离子束直接作用的细胞团的一面有外源gus基因的导入和表达。gus基因瞬间表达的最佳处理剂量悬浮细胞为2×l015N+/cm2,成熟胚为20×l015N+/cm2,而且30keV能量的离子束处理明显较20keV优越。SSC缓冲导入介质最为理想,而添加DMSO(一种细胞促渗透剂)的SSC和富含ca2+的kren’sF溶液(ca2+对促进质膜稳定性有好处)对离子束介导外源基因进入水稻细胞均不理想。
关键词: 离子束,转化,外源基因,水稻细胞
玉米原生质体培养再生植株
《安徽农业科学 》 1992
摘要:将玉米自交系“330”成熟胚诱导的愈伤组织,在附加2mg/L2,4—D的MSB培养基上继代、筛选,产生了三种类型的愈伤组织。用结构疏松,生长迅速的Ⅱ型胚性愈伤组织分离原生质体,在KPR或N_6ap培养基中以1×10~5/ml密度进行液体浅层培养,植板率为5.6%—7.4%。采用分步分化法得到了正常的绿苗,并经过壮根,炼苗后移栽成活。
籼稻花药培养中胚性细胞的利用和继代研究
《植物生理学通讯 》 1992 北大核心
摘要:诱发籼稻花药培养形成胚性细胞,并建立胚性细胞系,通过胚胎发育途径,在两个月内,由8块胚性细胞团经切割培养增殖获得再生绿苗12690株和白化苗若干。继代培养一年的胚性细胞团再生苗率仍高达90%,但畸变率高,移栽不易成活;检查胚性细胞532个,染色体变化呈多样性,但仍可分为12个同源染色体组。
水稻花培获得大群体健壮绿苗的研究
《安徽农业科学 》 1992
摘要:通过使用混合激素诱发籼稻871015、871109花粉愈伤形成胚性细胞;对籼稻花粉胚性细胞团和粳稻绿芽丛进行分割培养,快速繁育大群体绿苗获得成功。籼稻两个组合的8块胚性细胞团,在两个月内经3—5次切割培养获得绿苗12690株;粳稻花培绿芽丛仅经一次分割培养后的净增绿苗率127.2%,大幅度地提高了水稻花药培养再生绿苗率。分割培养的再生苗,健壮的形成特征:苗粗、浓绿、根多、洁白。良好的生理素质:发根力强,平均每棵试管苗多增根1.8条,根长度增长168.4%;平均每棵再生苗鲜重和干重分别增加0.29克和0.175毫克。