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低能离子束介导外源基因进入水稻细胞的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 杨剑波 1 ; 吴跃进 2 ; 吴李君 2 ; 吴家道 2 ; 余增亮 2 ;

作者机构： 1.安徽农科院水稻所

2.安徽农科院水稻所，中国科学院等离子体物理研究所

关键词： 离子束，转化，外源基因，水稻细胞

期刊名称： 安徽农业大学学报

ISSN： 10002197

年卷期： 1994 年 03 期

页码：

摘要： 用离子束介导法将编码β－葡萄糖苷酸酶的ｇｕｅ基因引入受体植物细胞，并实现瞬间表达。水稻悬浮细胞经离子束辐照后，电镜下能观察到细胞表面留下的溅射和刻蚀痕迹，细胞存活率随辐照剂量的增加而显著降低。将离子束（３０ｋｅＶ，２×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２）处理后的水稻悬浮细胞，浸入含有ｇｕｓ基因外源ＤＮＡ的ＳＳＣ温育介质，两天后，观察到受离子束直接作用的细胞团的一面有外源ｇｕｓ基因的导入和表达。ｇｕｓ基因瞬间表达的最佳处理剂量悬浮细胞为２×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２，成熟胚为２０×ｌ０１５Ｎ＋／ｃｍ２，而且３０ｋｅＶ能量的离子束处理明显较２０ｋｅＶ优越。ＳＳＣ缓冲导入介质最为理想，而添加ＤＭＳＯ（一种细胞促渗透剂）的ＳＳＣ和富含ｃａ２＋的ｋｒｅｎ’ｓＦ溶液（ｃａ２＋对促进质膜稳定性有好处）对离子束介导外源基因进入水稻细胞均不理想。

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