文献类型： 中文期刊

作者： 董万春 ¹ ; 樊婷婷 ¹ ; 阳立波 ¹ ; 江海坤 ² ; 张其安 ² ; 方凌 ² ; 倪娇娇 ¹ ; 管灵霞 ¹ ; 曹树青 ¹ ;

作者机构： 1.合肥工业大学生物与食品工程学院

2.安徽省农业科学院园艺研究所

关键词： 拟南芥;CDR6基因;过量表达载体;转基因植株

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2015 年 13 期

页码： 63-64+104

摘要： [目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株。[方法]提取拟南芥mRNA,反转录成c DNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的p XB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认。将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株。[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至p XB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株。[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础。