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苦茶槭嫩芽生长阶段RT-qPCR内参基因筛选及验证

文献类型： 中文期刊

作者： 焦小雨 1 ; 吴琼 1 ; 王文杰 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院茶叶研究所

关键词： 苦茶槭;嫩芽;内参基因;实时荧光定量反转录PCR;表达分析

期刊名称： 植物生理学报

ISSN： 2095-1108

年卷期： 2025 年 61 卷 008 期

页码： 1097-1108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 苦茶槭的幼嫩芽叶经加工制成的“高茶(皋茶)”是一种代用茶饮,富含多种对健康有益的成分。为了解苦茶槭嫩芽生长过程中有效成分合成相关基因的表达水平,需要筛选稳定表达的内参基因,以提高分析结果的准确性。本研究基于苦茶槭嫩芽生长阶段的转录组数据,初步筛选出9个候选内参基因,通过RT-qPCR技术检测候选内参基因的表达量,并利用3种常用软件(geNorm、NormFinder和BestKeeper)以及RefFinder在线工具对候选内参基因的表达稳定性进行评价,选用类黄酮合成相关基因对内参基因稳定性进行验证。RefFinder综合评估结果显示, TUA、PP2A和ACT2的表达较为稳定,而SAND在所有候选内参基因中始终排名最低,稳定性最差。内参稳定性验证结果表明, TUA、PP2A、ACT2及其组合适宜作为内参基因用于苦茶槭嫩芽中基因表达研究,其中, ACT2是较好的选择。本研究结果为在苦茶槭中开展基因表达分析和功能研究奠定了基础。

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