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家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 汤强 1 ; 方玲 2 ; 章玉萍 3 ;

作者机构: 1.安徽省农业科学院蚕桑研究所中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所芜湖职业技术学院

2.芜湖职业技术学院

3.安徽省农业科学院蚕桑研究所

关键词: G蛋白α亚基;BmGα73B;RT-PCR;克隆;原核表达

期刊名称: 中国蚕业

ISSN: 1007-0982

年卷期: 2012 年 03 期

页码: 19-22

摘要: 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。

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