文献类型: 中文期刊
作者: 王莉 1 ; 黄安宁 1 ; 李槿年 1 ; 张丹俊 2 ; 刘雪兰 1 ;
作者机构: 1.安徽农业大学动物科技学院
2.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: J亚群禽白血病病毒;SYBR GreenⅠ;荧光定量PCR;病毒基因表达水平
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2013 年 35 卷 09 期
页码: 733-737
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp~5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了ALV-J SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示该方法的最低检测限度为2.36×102拷贝/μL,比普通PCR高100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%。表明本研究建立的方法具有良好的特异性、稳定性和灵敏性。采用该方法对100只临床病鸡进行检测,ALV的检出率为44%。随机选择10只感染阳性鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV-J在各主要脏器中均有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高。
- 相关文献
[1]猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用. 沈学怀,潘孝成,巩雅静,张丹俊,赵瑞宏,胡小苗,戴银,侯红艳,周学利,朱传民. 2014
[2]J亚群禽白血病病毒安徽分离株的鉴定及其gp85基因序列分析. 安好峰,戴银,潘孝成,侯宏艳,赵瑞宏,胡晓苗,李福宝,张丹俊. 2012
[3]安徽省五华鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因分子序列特征分析. 戴银,赵瑞宏,胡晓苗,张丹俊,夏松林,盛昌树,杨文超,钟国发. 2013
[4]黄羽鸡J亚群禽白血病病毒的分离及gp85基因分析. 潘孝成,赵瑞宏,胡晓苗,沈学怀,周学利,戴银,侯宏艳,张丹俊. 2014
作者其他论文 更多>>
-
猪流行性腹泻病毒N-E.coli OmpA融合基因构建、表达及其免疫原性评价
作者:沈学怀;汪洁茹;尹磊;周学利;赵瑞宏;潘孝成;戴银;殷冬冬;张丹俊;胡晓苗;侯宏艳
关键词:PEDV N基因;E.coli OmpA基因;基因融合;基因表达;免疫原性
-
番鸭细小病毒NS和VP基因的克隆及序列分析
作者:戴银;胡晓苗;赵瑞宏;张丹俊;潘孝成;沈学怀;尹磊;周学利;侯宏艳
关键词:番鸭细小病毒;NS基因;VP基因;序列分析
-
鸡白痢沙门菌感染雏鸡的骨髓miRNA表达谱分析
作者:尹磊;潘孝成;沈学怀;张丹俊;戴银;王洁茹
关键词:鸡白痢沙门菌;感染;骨髓;miRNA;免疫反应
-
复方中药发酵饲料对母猪繁殖性能、血清生化指标和肠道菌群的影响
作者:沈学怀;张丹俊;赵瑞宏;潘孝成;尹磊;戴银;胡晓苗;周学利;侯宏艳
关键词:复方中药发酵饲料;母猪;繁殖性能;血清生化指标;肠道菌群
-
GPV·MDPV和FAdV-4三重PCR检测方法的建立
作者:戴银;胡晓苗;赵瑞宏;张丹俊;潘孝成;沈学怀;尹磊;周学利;侯宏艳
关键词:鹅细小病毒(GPV);番鸭细小病毒(MDPV);禽腺病毒4型(FAdV-4);三重PCR检测
-
复方中药发酵饲料对母猪血清生化指标和免疫机能的影响
作者:沈学怀;赵瑞宏;张丹俊;蔡志祥;潘孝成;姚海清;尹磊;戴银;胡晓苗;周学利;侯宏艳
关键词:复方中药发酵饲料;母猪;血清生化指标;免疫机能
-
猪传染性胃肠炎病毒疫苗株S基因的克隆及其与流行株的比对分析
作者:侯宏艳;潘孝成;尹磊;张丹俊;赵瑞宏;胡晓苗;周学利
关键词:猪传染性胃肠炎病毒;疫苗株;流行株;S基因;遗传变异