科研产出
鸡白痢沙门菌感染雏鸡的骨髓miRNA表达谱分析
《畜牧兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：旨在探究鸡白痢沙门菌（Salmonella enterica serovar Pullorum,S. Pullorum）感染雏鸡后骨髓miRNA的差异表达特征，为深入了解鸡白痢沙门菌的致病机制提供理论基础。将7日龄SPF雏鸡随机分为两组，分别口服鸡白痢沙门菌和PBS,于感染24 h后采集骨髓进行miRNA测序，筛选差异倍数≥2且P值≤0.05的差异表达miRNAs进行靶基因预测以及GO、KEGG富集分析，随机选取6个miRNAs进行qRT-PCR验证，构建与免疫过程相关的miRNA-mRNA靶点网络。通过miRNA测序，共获得20个已知的差异表达miRNAs,其中11个上调，9个下调。qRT-PCR结果表明，miRNA变化趋势与测序结果一致。GO分析结果表明，差异表达基因主要富集在膜运输、信号转导、免疫系统、碳水化合物代谢、糖类的生物合成和代谢等，KEGG的信号通路主要富集在Notch信号通路、Hedgehog信号通路、PPAR信号通路、AMPK信号通路、Hippo信号通路等，miRNA-mRNA网络互作发现，gga-miR-1466和gga-miR-6643-5p可能是参与免疫过程相关的关键miRNA。本研究解析了鸡白痢沙门菌感染雏鸡的骨髓miRNA表达谱特征，为了解鸡白痢沙门菌和鸡之间相互作用的复杂分子致病机制提供了新的见解，为防控鸡白痢沙门菌感染提供了新策略。
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鸡传染性支气管炎病毒合肥分离株S1基因序列及致病性分析
《中国动物传染病学报 》 2021
摘要：从安徽合肥一养殖户送检的临床样品中分离到一株鸡传染性支气管炎病毒,命名为HF200702。分离株在鸡胚盲传3代过程中可引起典型的侏儒胚现象;基于分离株S1基因序列对毒株进行分型结果显示,分离株属于目前流行的QX型,与H120、M41、4/91、QX等疫苗株的同源性分别为76.1%、75.6%、78.3%、95.0%;用分离株第10代鸡胚尿囊液感染1日龄SPF雏鸡,对雏鸡的致死率为41.6%,感染鸡出现精神沉郁、张口呼吸、气管啰音等临床症状以及气管纤毛摆动停滞、肾脏肿大、尿酸盐沉积等病理变化。感染鸡从感染后第2 d开始持续向外界排毒直至感染后28 d。该研究数据表明,从安徽合肥某养鸡场疑似发生传染性支气管炎的鸡群中分离到QX型的IBV,该毒株对雏鸡有较强的致病作用,研究结果为了解该地区IBV的流行情况提供了参考数据。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 合肥分离株 S1基因序列分析 致病性
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复方中药发酵饲料对母猪繁殖性能、血清生化指标和肠道菌群的影响
《中国畜牧杂志 》 2021 北大核心
摘要：为研究复方中药发酵饲料对母猪繁殖性能、血清生化指标和肠道微生物菌群的影响,本试验选取20头经产母猪分为对照组和试验组,每组10头。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中加入20%的复方中药发酵饲料。对试验组和对照组的平均窝产活仔数、平均窝产弱仔率和仔猪腹泻率进行分析;在第0、15、30天测定2组母猪的血清生化指标,在第15天采集母猪粪便样品,测定微生物菌群变化。结果显示:与对照组相比,试验组母猪的平均窝产活仔数增加（P>0.05）,平均窝产弱仔率（P>0.05）和仔猪平均腹泻率（P<0.05）降低;与对照组相比,试验组血清总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶和过氧化氢酶含量在第15天和30天均升高（P<0.01）;试验组血清丙二醛、谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量在第15天和30天均显著或极显著低于对照组;饲喂复方发酵中药饲料可提高母猪的肠道微生物多样性和稳定性（P>0.05）,并且可显著提高克里斯滕森氏菌属R-7群、乳杆菌属、瘤胃菌科UCG-002、拟杆菌属等有益菌的相对丰度,显著降低密螺旋体属2、链球菌属、副拟杆菌属和大肠杆菌-志贺氏菌属等菌群的丰度。综上所述,饲喂复方中药发酵饲料可提高母猪的繁殖性能,提高机体抗氧化能力,改善母猪的肠道菌群结构。
关键词： 复方中药发酵饲料 母猪 繁殖性能 血清生化指标 肠道菌群
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复方中药发酵饲料对母猪血清生化指标和免疫机能的影响
《养猪 》 2021
摘要：为研究复方中药发酵饲料对母猪血清生化指标和免疫机能的影响,研究选取20头经产母猪随机分为对照组和试验组,每组10头,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中加入20%的复方中药发酵饲料。在第0天、第15天和第30天分别采集两组母猪的血清,测定血清生化指标和免疫指标。结果显示,与对照组相比,试验组血清总抗氧化能力（T-AOC）极显著升高（P<0.01）;血清总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）含量在第15天和第30天极显著升高（P<0.01）;试验组血清甘油三酯（TG）和总胆固醇（T-CHO）含量呈逐渐降低的趋势,在第15天和第30天不同程度降低。试验组血清IgG和IgA含量在使用复方中药发酵饲料后逐渐升高,在第30天极显著高于对照组（P<0.01）;试验组血清IgM含量略有升高,但未达到显著性差异（P>0.05）。试验组血清干扰素（IFN）-α和IFN-β的含量高于对照组,但仅IFN-α在第30天的含量达到极显著差异（P<0.01）。综上所述,饲喂复方中药发酵饲料可提高母猪机体抗氧化能力,促进机体蛋白质的代谢和吸收,提高母猪的免疫能力。
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GPV·MDPV和FAdV-4三重PCR检测方法的建立
《安徽农业科学 》 2021
摘要：[目的]为快速地鉴别鹅细小病毒（GPV）、番鸭细小病毒（MDPV）和禽腺病毒血清4型（FAdV-4）3种病毒,建立一种特异强、敏感高、重复性好的三重PCR检测方法。[方法]根据Genbank登录的MDPV、GPV和FAdV-4的基因序列,设计3对特异性引物,以提取的核酸为模板,进行PCR特异性、敏感性和重复性试验。[结果]采用所建立的方法能够扩增出GPV、MDPV和FAdV-4特异性片段,且不能检出鸭黄病毒（DFV）、鸭I型肝炎病毒（DVH-Ⅰ）和禽呼肠孤病毒（ARV）;GPV、MDPV和FAdV-4核酸模板的最低检测量分别为20、2、2 pg;对8份阳性临床病料进行检测,可见MDPV、GPV和FAdV-4的检出率均为100%。[结论]建立的三重PCR检测方法能够对MDPV、GPV和FAdV-4这3种病毒进行快速、准确的诊断。
关键词： 鹅细小病毒（GPV） 番鸭细小病毒（MDPV） 禽腺病毒4型（FAdV-4） 三重PCR检测
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猪传染性胃肠炎病毒疫苗株S基因的克隆及其与流行株的比对分析
《畜牧与饲料科学 》 2021
摘要：[目的]分析猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV）疫苗株和流行株S基因的遗传变异特征。[方法]利用RT-PCR方法对国内目前广泛使用的TGEV疫苗株A、B、C的S基因进行克隆并测序,将获得的序列与近年来公开发表的分离自不同地区的TGEV毒株S基因序列进行比对分析;选取NCBI中登录号为AF104420.1-Britain、AY587882.1-Nanjing、DQ811786.2-America、EU074218.2-Harbin、FJ755618.2-Harbin、JQ700304-fuzhou、KC609371.1-Shanghai、KX900411.1-United States、M94099.1-Spain和MK272773.1-Fushun的TGEV流行株S基因序列,与疫苗株A、B、C的S基因序列一起,利用MegAlign软件进行比对分析。[结果]疫苗株A、B、C的S基因序列两两间的同源性均在96.7%以上;疫苗株A、B、C的S基因序列与NCBI中流行株S基因序列的同源性分别在94.43%～99.82%、95.30%～99.64%、93.48%～98.38%;由遗传进化树可知,疫苗株A、C与国外流行株M94099.1-Spain在同一分支上,疫苗株B与国内流行株JQ700304-fuzhou在另一分支上。[结论]TGEV疫苗株的S基因与流行株同源性较高,变异性不大。
关键词： 猪传染性胃肠炎病毒 疫苗株 流行株 S基因 遗传变异
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安徽省专业化后备蛋鸡饲养场现状调研报告
《中国家禽 》 2020 北大核心
摘要：为了解安徽省后备蛋鸡养殖现状,国家蛋鸡产业技术体系合肥综合试验站组织团队成员于2019年8月-12月在安徽省开展了相关调研,对安徽省后备蛋鸡场的数量、区域布局、养殖规模、养殖模式、鸡舍类型、设施设备以及饲料供给和疫病防控等现状进行了详细调查与分析.结果 显示:目前安徽省后备蛋鸡规模养殖场共有10家,年出栏规模为11万~88万只,全年出栏量600万只左右,约占安徽省蛋鸡存栏总量的12%,尚有较大提升空间;专业后备蛋鸡场主要分布在皖北地区,鸡舍以全封闭式为主,销售日龄为60日龄,养殖模式逐渐从阶梯式笼养转变为层叠式笼养,舍内设施基本实现了自动化;饲料供给在20日龄前以全价颗粒料为主,20日龄后以自配全价粉料为主;疫病防控及用药成本不同鸡场有较大差异,部分鸡场存在免疫程序不合理及选用的疫苗株与临床流行株不一致的问题,需要加以改进和完善.本次调研初步掌握了安徽省后备蛋鸡的养殖现状,揭示了养殖中存在的问题和短板,明确了改进目标和方向,对促进和提升安徽省后备蛋鸡养殖水平具有重要指导意义.
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仔猪小肠上皮细胞的体外培养及猪流行性腹泻病毒对其感染性研究
《中国畜牧兽医 》 2020 北大核心
摘要：本研究旨在建立一种操作简单的仔猪小肠上皮细胞体外培养体系,为猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的相关研究提供材料.研究以未吃初乳的新生仔猪作为肠道供体,采用肠腔面刮取肠黏膜和机械分离分散的方式进行原代细胞的体外分离.采用0.1%胰蛋白酶差速消化法进行仔猪小肠上皮细胞的纯化;比较新生弱仔猪和正常仔猪作为供体对原代小肠上皮细胞活性的影响;MTT法比较不同代次原代细胞的增殖活性;免疫荧光和实时荧光定量RT-PCR方法检测PEDV毒株CV777在原代小肠上皮细胞感染和增殖情况.结果显示,本研究建立的体外分离培养方法能获得增殖活性良好的原代小肠上皮细胞,具有明显的"S"型细胞增殖曲线.通过胰酶差速消化可得到纯度高、形态单一的小肠上皮细胞,同时细胞连续传代5次仍保持良好的增殖活性.弱仔猪和正常仔猪分离培养的小肠上皮细胞的增殖活性比较显示,两者并没有明显区别,这为降低原代细胞培养的成本提供新的思路.免疫荧光和实时荧光定量RT-PCR结果显示,PEDV可感染本方法分离培养的仔猪原代小肠上皮细胞,并在其中进行复制增殖.本研究建立了一种操作简单、实用性强、成本较低的仔猪原代小肠上皮细胞体外培养方法,该方法培养的原代细胞可作为PEDV分离培养和相关研究的基础材料.
关键词： 仔猪小肠上皮细胞 体外培养 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 增殖活性 细胞传代
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3种中药制剂对肠炎沙门菌的体外抗菌和雏鸡感染试验
《中国兽医杂志 》 2020 北大核心
摘要：为评价香莲溶液、连蒲双清颗粒和高山大巴对沙门菌的体外抗菌以及对雏鸡感染沙门菌的保护性作用,测定3种药物的体外最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）及雏鸡接种肠炎沙门菌后的组织病变、体重、血清应激和抗氧化指标。结果显示,在试验范围内香连溶液的MIC和MBC分别为1∶300和1∶100;连蒲双清颗粒无体外抑菌和杀菌效果;高山大巴的MIC为24 g/L,试验浓度内未表现出杀菌效果;香连溶液和高山大巴的抗菌效果不受菌株耐药性的影响。3种中药可不同程度地减少沙门菌感染造成的组织病变和感染后期组织中沙门菌分离率,提高感染雏鸡的体重,降低血清中乳酸脱氢酶（LDH）、谷丙转氨酶（ALT/GPT）和丙二醛（MDA）水平,提高感染早期超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的含量。本试验为市售中药防控沙门菌感染提供试验依据。
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