家蚕G蛋白a亚基基因BmGa73B原核表达及其表达条件优化

汤强; 方玲; 章玉萍; 《中国蚕业 》 2012

摘要：通过RT.PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白a亚基基因BmGa73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至EcoliBL21诱导表达,用SDS.PAGE与Westernblot对表达产物进行鉴定.结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1158bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET41b(+)-Ga73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1mmol/L时,诱导dh时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符.经Westernblot检测,表达产物可与GST发生特异性反应.

关键词： G蛋白0a亚基 BmGa73B RT-PCR 克隆 原核表达