鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

赵瑞宏; 张丹俊; 潘孝成; 程宝艳; 胡晓苗; 《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心

摘要：为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。

关键词： 鸭肝炎病毒R85952株 VP1基因 克隆 表达