家蚕抗菌肽基因Cecropin-D的克隆及其真核表达载体的构建

章玉萍; 范涛; 马忠友; 代君君; 王储言; 李瑞雪; 吴传华; 田善富; 肖林珍; 《北方蚕业 》 2010

摘要：从家蚕中提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,获得了家蚕Cecropin-D基因编码区的cDNA,扩增出家蚕抗茵肽Cecropin-D成熟肽基因片段,重组克隆入pMD18-Tvector载体,经DNA测序,该基因为186bp,编码62个氨基酸。用限制性内切酶切下目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建真核表达栽体pPlC9K-CD。本实验的研究为获得超量表达的高活性表达抗菌肽Cecropin-D以及为研制具有抗菌活性的新型基因药物奠定了基础。

关键词： 家蚕 抗菌肽 Cecropin-D 克隆 表达栽体pPIC9K