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资源类型: 中文期刊
关键词:蛋白互作(模糊匹配)
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长毛兔粗、细毛毛囊转录组比较分析

中国农业大学学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为筛选出影响兔毛纤维直径的相关基因及调控通路,本研究采用RNA测序(RNA-seq)鉴定长毛兔粗、细毛毛囊中差异表达的基因,并进行差异基因(DEGs)功能富集分析。通过Cytoscape构建蛋白互作网络,筛选出核心基因,最后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对差异表达基因进行验证。结果表明:1)RNA-seq共鉴定了412个DEGs,相比粗毛毛囊,160个DEGs在细毛毛囊上调表达,252个DEGs下调表达。2)GO功能富集分析显示,差异基因显著富集到330个条目中,包括蜕皮周期、发周期、毛发周期的调节、超分子纤维等与粗、细毛生长相关的条目;KEGG富集分析表明差异表达基因显著富集在雌激素信号通路、蛋白质消化和吸收、内质网中的蛋白质加工途径、PPAR信号通路、FoxO信号通路和基底细胞癌等与长毛兔粗、细毛生长分化有关的信号通路中。3)蛋白互作网络分析表明SHH、LGR5、CTSB、ACTA2和CRNN等是调控毛纤维结构的重要功能基因。综上,本研究鉴定了调控兔毛直径的差异表达基因,挖掘出5个与长毛兔粗、细毛分化相关的候选基因,为细毛型长毛兔的选育提供理论依据和数据支撑。

关键词: 长毛兔 毛囊 纤维直径 RNA-seq 蛋白互作

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薏苡ClVQ12的表达模式、抗旱功能及互作蛋白分析

2025

摘要:目的薏苡(Coix lacryma-jobiL.)是重要的食药同源作物,干旱和土壤盐碱化对薏苡的产量与品质造成严重威胁,VQ基因家族在植物响应外界胁迫与激素诱导中发挥重要作用,克隆薏苡VQ基因家族成员ClVQ12,并分析其表达模式、抗旱能力及互作蛋白,进一步探究VQ基因在薏苡生长发育和胁迫响应过程中所发挥的功能。方法以“皖薏2号”为材料,首先克隆ClVQ12和对其进行生物信息学分析;接着通过亚细胞定位试验确定其位置,使用qRT-PCR分析其在MEJA和ABA诱导、高温胁迫、盐胁迫和干旱胁迫下的表达模式,然后构建ClVQ12基因酵母表达载体并转入酵母,比较转基因酵母和对照酵母在干旱胁迫下的生长差异;并利用酵母双杂试验验证ClVQ12与ClVQs和ClWRKYs之间的相互作用。结果成功克隆ClVQ12,该基因开放阅读框长度为579 bp;编码192个氨基酸;等电点为5.06;平均亲水性系数为-0.52,是不稳定的亲水性蛋白;该基因定位于细胞膜和细胞核中;不含有跨膜结构域和信号肽,含有18个磷酸化位点。二级结构主要由不规则卷曲(61.46%)、α-螺旋(32.29%)、延长链(4.17%)和β-折叠(2.08%)组成。启动子顺式作用元件分析发现ClVQ12含有多个响应激素诱导和非生物胁迫的元件。表达模式分析表明,该基因受到MEJA、ABA处理和干旱胁迫的显著诱导,其表达量在高温胁迫和盐胁迫下被显著抑制。与pYES2空载酵母相比,ClVQ12转基因酵母在甘露醇模拟干旱胁迫下具有更高的存活率,生长状况更好。通过酵母双杂试验发现,ClVQ12ClVQ4ClVQ11ClVQ26ClWRKY51发生相互作用,与ClWRKY5不发生相互作用。结论ClVQ12基因具有典型的VQ基因家族特征,定位于细胞膜和细胞核,响应多个激素处理和非生物胁迫。ClVQ12ClVQsClWRKY51发生相互作用,提高转基因酵母的耐旱性。

关键词: 薏苡 ClVQ12 VQ基因家族 生物信息学分析 抗旱验证 蛋白互作

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薏苡ClVQ12的表达模式、抗旱功能及互作蛋白分析

江西农业大学学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】薏苡(Coix lacryma-jobi L.)是重要的食药同源作物,干旱和土壤盐碱化对薏苡的产量与品质造成严重威胁,VQ基因家族在植物响应外界胁迫与激素诱导中发挥重要作用,克隆薏苡VQ基因家族成员ClVQ12,并分析其表达模式、抗旱能力及互作蛋白,进一步探究VQ基因在薏苡生长发育和胁迫响应过程中所发挥的功能。【方法】以“皖薏2号”为材料,首先克隆ClVQ12和对其进行生物信息学分析;接着通过亚细胞定位试验确定其位置,使用qRT-PCR分析其在MEJA和ABA诱导、高温胁迫、盐胁迫和干旱胁迫下的表达模式,然后构建ClVQ12基因酵母表达载体并转入酵母,比较转基因酵母和对照酵母在干旱胁迫下的生长差异;并利用酵母双杂试验验证ClVQ12与ClVQs和ClWRKYs之间的相互作用。【结果】成功克隆ClVQ12,该基因开放阅读框长度为579 bp;编码192个氨基酸;等电点为5.06;平均亲水性系数为-0.52,是不稳定的亲水性蛋白;该基因定位于细胞膜和细胞核中;不含有跨膜结构域和信号肽,含有18个磷酸化位点。二级结构主要由不规则卷曲(61.46%)、α-螺旋(32.29%)、延长链(4.17%)和β-折叠(2.08%)组成。启动子顺式作用元件分析发现ClVQ12含有多个响应激素诱导和非生物胁迫的元件。表达模式分析表明,该基因受到MEJA、ABA处理和干旱胁迫的显著诱导,其表达量在高温胁迫和盐胁迫下被显著抑制。与pYES2空载酵母相比,ClVQ12转基因酵母在甘露醇模拟干旱胁迫下具有更高的存活率,生长状况更好。通过酵母双杂试验发现,ClVQ12与ClVQ4、ClVQ11、ClVQ26和ClWRKY51发生相互作用,与ClWRKY5不发生相互作用。【结论】ClVQ12基因具有典型的VQ基因家族特征,定位于细胞膜和细胞核,响应多个激素处理和非生物胁迫。ClVQ12与ClVQs和ClWRKY51发生相互作用,提高转基因酵母的耐旱性。

关键词: 薏苡 ClVQ12 VQ基因家族 生物信息学分析 抗旱验证 蛋白互作

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