科研产出
转基因大豆CAL16转化体特异性定量检测方法的建立
《中国油料作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：以杭州瑞丰生物科技有限公司研发的转Cry1Ab/Vip3Da基因抗虫大豆，即转基因大豆CAL16为材料，建立CAL16转化体特异性定量PCR检测方法，旨在给我国CAL16及其衍生品系的生物育种产业化提供技术支撑。根据5′端和3′端旁侧序列设计引物探针组合，筛选出5′端一对最佳引物组合，PCR产物片段大小为112 bp。经特异性测试、标准曲线的建立、正确度和精密度测试、检出限和定量限测试、稳健性测试、微滴式数字PCR验证，该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。检出限达到0.025%，相当于10个拷贝的CAL16特异性片段；定量限达到0.1%，约为40个拷贝。实验室间循环验证显示：该方法符合国家标准方法各项要求，可满足检测需求。最终对CAL16定量方法进行不确定度评定，确保量值科学可靠，满足定量标识的需求。
关键词： 转基因大豆 CAL16 转化体特异性 定量检测 不确定度
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实时荧光PCR技术定量检测转Bt基因水稻的研究
《生物学杂志 》 2008 CSCD
摘要：以转Bt基因的"克螟稻"为研究材料,通过使用特异的引物和荧光标记探针,以已知转基因成份含量的水稻样品为模板建立标准曲线,对转基因水稻的NOS和Bt外源基因进行了荧光定量检测分析。初步建立了转基因水稻定量检测的技术方法。
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实时荧光PCR技术定量检测转基因大豆方法的研究
《作物学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：以转基因大豆Roundup Ready为材料,通过特异性引物和探针,对转基因大豆中外源基因cp4-epsps进行了定量检测。研究发现Taqman荧光探针法和SYBR荧光染料法均可作为转基因大豆定量检测的方法,但前者比后者具更高的检测灵敏度和精确度,其检测阈值可降到0.05%,变异系数为0.09%～0.53%。在此基础上,建立和优化了Taqman探针实时荧光定量PCR检测技术体系,有助于提高转基因作物及产品的生物安全性定量检测的准确度和可靠性。
关键词： 实时荧光PCR 转基因大豆 Taqman探针 SYBR染料 定量检测
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