砀山酥梨多酚氧化酶基因(PbPPO)的原核表达及优化研究

常艳; 刘晓峰; 金青; 蔡永萍; 聂凡; 林毅; 《亚热带植物科学 》 2017

摘要：从砀山酥梨Pyrus bretschneideri ‘Dangshan Su’果实中克隆得到一条多酚氧化酶基因(PbPPO)的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF809859)。通过生物信息学分析表明,PbPPO基因CDS区全长1782 bp,编码593个氨基酸,氨基酸序列由N端叶绿体转运肽、Cu结合区与C端疏水区三部分组成。为进一步研究Pb PPO基因的功能,成功构建其原核表达载体pET-28a-PbPPO,并在大肠杆菌Rosetta菌株中成功诱导表达,经优化后显示,在28℃、1.0 mmol·L~(-1) IPTG诱导5 h的条件下,融合蛋白表达量最高。

关键词： 厚砀山酥梨 木质素 石细胞 多酚氧化酶 原核表达