苦茶槭嫩芽生长阶段RT-qPCR内参基因筛选及验证

焦小雨; 吴琼; 王文杰; 《植物生理学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：苦茶槭的幼嫩芽叶经加工制成的“高茶(皋茶)”是一种代用茶饮,富含多种对健康有益的成分。为了解苦茶槭嫩芽生长过程中有效成分合成相关基因的表达水平,需要筛选稳定表达的内参基因,以提高分析结果的准确性。本研究基于苦茶槭嫩芽生长阶段的转录组数据,初步筛选出9个候选内参基因,通过RT-qPCR技术检测候选内参基因的表达量,并利用3种常用软件(geNorm、NormFinder和BestKeeper)以及RefFinder在线工具对候选内参基因的表达稳定性进行评价,选用类黄酮合成相关基因对内参基因稳定性进行验证。RefFinder综合评估结果显示, TUA、PP2A和ACT2的表达较为稳定,而SAND在所有候选内参基因中始终排名最低,稳定性最差。内参稳定性验证结果表明, TUA、PP2A、ACT2及其组合适宜作为内参基因用于苦茶槭嫩芽中基因表达研究,其中, ACT2是较好的选择。本研究结果为在苦茶槭中开展基因表达分析和功能研究奠定了基础。

关键词： 苦茶槭 嫩芽 内参基因 实时荧光定量反转录PCR 表达分析