科研产出
超速离心和酸沉淀制备牛乳清的蛋白质组学研究
《中国畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：本研究旨在对超速离心法和酸沉淀法鉴定的乳清蛋白进行分析,并比较不同样品制备方法对乳清蛋白组鉴定结果的影响。采集牛奶样品去除脂肪,利用超速离心和酸沉淀法制备乳清蛋白,液相色谱串联质谱分析结合数据库搜索鉴定,比较两种方法制备的乳清蛋白的差异,分析了差异蛋白参与的生物过程、细胞组成和分子功能等。聚类分析和主成分分析展示了两种样品制备方法的差异蛋白,超速离心方法鉴定的表达量增加的蛋白有53个,包括β-酪蛋白、糖基化依赖细胞黏附分子1和多聚免疫球蛋白受体等;酸沉淀方法鉴定的表达量增加的蛋白有21个,包括CD9抗原、β2-微球蛋白和β-乳球蛋白等。将两种方法获得的差异蛋白根据蛋白注释分类发现,超速离心法中高表达的蛋白主要位于胞外区域、囊泡、内膜系统、内质网和高尔基体等,涉及蛋白结合、酶调节活性、受体结合和抗氧化活性等;酸沉淀法中高表达的蛋白主要位于胞外区域和囊泡等,涉及结合、核酸酶活性和离子结合等。结果提示,两种方法鉴定的蛋白质组表达模式存在差异,乳清蛋白样品制备方法的结合可以获得更多的鉴定蛋白,为乳清蛋白组学研究中样品制备方法的选择提供参考依据。
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高体细胞数低乳糖含量时牛乳清蛋白组分变化的研究
《畜牧兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：旨在分析奶牛牛乳中体细胞数升高乳糖含量降低的同时乳清蛋白的表达变化。依据牛乳中体细胞数和乳糖含量,分为高体细胞数低乳糖含量组和正常牛奶组,超速离心分离乳清,采用二维凝胶电泳技术分离了高体细胞数低乳糖和正常牛乳清蛋白,考马斯亮蓝G-250溶液染色,基质辅助激光解析飞行时间质谱检测表达变化的蛋白点。高体细胞数低乳糖含量的牛乳中β酪蛋白含量降低,而白蛋白、结合珠蛋白、乳铁蛋白、转铁蛋白和抗菌肽1等乳清蛋白表达量增加。表明随着牛乳中乳糖含量的降低,乳清蛋白组分表达量增加,这可能是奶牛乳腺在乳糖合成降低时乳腺上皮细胞完整性破坏引起的防御应答。
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