土壤中烟草根黑腐病菌的real-time PCR分子检测

许大凤; 叶磊; 张丽娜; 韩永镜; 周本国; 檀根甲; 《中国烟草学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：根据烟草根黑腐菌与其它近缘真菌在ITS序列上的差异,设计PCR检测引物TbF/TbR,并通过对各菌株基因组DNA扩增验证其特异性;以接种10倍浓度梯度的根黑腐菌孢子的土壤DNA为模板,建立土壤烟草根黑腐菌real-time PCR检测的标准曲线,得出每个反应体系中分生孢子数目的对数(x)和对应的Ct值(y)之间呈线性关系:y=-1.5373x+24.955,R2=0.9909(P<0.01).通过对5块烟田土壤烟草根黑腐菌检测和烟田烟草根黑腐病的调查,证实上述方法可以准确检测土壤中烟草根黑腐菌孢子数量.

关键词： 烟草根黑腐病 rDNA-ITS real-time PCR