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桑树miR166f的表达分析及双元超表达载体的构建

文献类型： 会议论文

第一作者： Li Ruixue

作者： Li Ruixue 1 ; 李瑞雪 1 ; Gao Xinwen 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥 230061

关键词： 桑树;微小核糖核酸166f;基因表达;高盐胁迫;干旱胁迫;抗逆功能

会议名称： 北方蚕业科研协作区第三十一届学术年会

主办单位： 山东蚕学会

页码： 00000178-00000192

摘要： MicroRNA(miRNA)在植物生理生化进程、信号传导、细胞调亡、响应生物和非生物胁迫等方面发挥重要功能,本文旨在克隆miR166f及其前体序列,分析其时空表达特性,并构建用于瞬时表达的miR166f双元超表达载体,为桑树miR166f抗旱功能的进一步探究奠定基础.克隆获得了桑树miR166f及其前体序列,pre-miR166f长91bp,miR166f长21bp,miR166f在前体的3′臂上,pre-miR166f最小折叠自由能(MEF)为-217.14kj/mol,具有典型的植物miRNA前体二级结构特征;miR166f5′端上游除了包含典型的具有转录起始功能的TATA-box和CAAT-box外,还含有多个胁迫响应顺式作用元件和一些激素响应元件;qRT-PCR分析表明在桑树不同组织中miR166f的相对表达量有较大差异,其中在茎中表达量最高,在木质部中表达量最低;miR166f在高盐和干旱胁迫处理下均上调表达,表明该基因参与了桑树的抗逆响应过程;成功构建了用于瞬时转化表达的miR166f双元超表达载体pCAMBIA-35S-GUS-miR166f,为桑树miR166f抗逆功能的进一步探究奠定基础.

分类号： S888.2

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