文献类型: 会议论文
第一作者: 张小飞
作者: 张小飞 1 ; 南京天邦生物科技有限公司 2 ; 温立斌 1 ; 潘孝成 3 ;
作者机构: 1.江苏省农科院兽医研究所,江苏,南京,210014
2.江苏,南京,211102
3.安徽省农科院畜牧兽医研究所,安徽,合肥,230031
关键词: 鸭肝炎病毒;A66株;cDNA文库;序列分析
会议名称: 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
主办单位: 中国微生物学会
页码: 400-404
摘要: 本研究根据已发表的小核糖核酸病毒(picornavirus)核苷酸序列设计4对引物.以RNAiso Reagent试剂抽提含DHVA66鸡胚尿囊液总RNA,用TakaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0试剂盒进行RT-PCR扩增,结果仅P3引物对能扩增出大小约700bp的片段,将所得PCR产物回收并克隆于pMD18-T载体、转化感受态细菌DH5 a,利用氨苄青霉素筛选阳性克隆子,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切鉴定重组质粒.取重组阳性质粒进行测序,测序结果与近期GenBank登录的3株Ⅰ型DHV核苷酸序列比对,显示与03D株、H株、5886株DHV的核苷酸序列同源性分别为96.8%、96.3%、96.2%,表明成功的构建了DHVA66株部分cDNA文库.
分类号: S855.3`S858.32
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