文献类型： 中文期刊
作者： 沈学怀 1 ; 张丹俊 1 ; 潘孝成 1 ; 戴银 1 ; 赵瑞宏 1 ; 胡晓苗 1 ; 侯红艳 1 ; 周学利 1 ; 朱传民 1 ;
作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： MDEF;消化方式;血清浓度;冻存;离心;细胞活率
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2015 年 11 期
页码： 74-78
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为建立番鸭胚成纤维细胞(MDEF)的体外培养、传代和冻存技术,选用11胚龄番鸭胚,2.5g/L胰蛋白酶消化,原代MDEF于含100 mL/L血清的DMED培养液中培养;研究热、冷两种消化方法对MDEF消化密度及活率的影响,探讨不同血清浓度对MDEF生长、冻存活性的影响,以及离心对MDEF传代和复苏时细胞活率的影响。结果显示,胰酶消化法获得了MDEF,细胞贴壁紧密,生长良好;冷消化得到的原代MDEF密度和活率均高于热消化;血清浓度在20mL/L~100mL/L范围内,浓度越高MDEF生长速度越快;血清浓度显著影响MDEF复苏的活率;MDEF冻存液中DMSO∶血清∶培养液比例为1∶2∶7冻存效果良好;在MDEF传代和复苏过程中去除离心操作,不仅可简化操作,细胞活率也有一定提高。本研究建立了MDEF的原代分离和培养方法,为适用于番鸭相关研究的体外细胞培养体系奠定基础。
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