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鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 戴银 1 ; 王承志 2 ; 刘生杰 3 ; 沈学怀 1 ; 赵瑞宏 1 ; 胡晓苗 1 ; 张丹俊 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

2.安徽农业大学动物科技学院

3.阜阳师范学院生物与食品工程学院

关键词： 鸡MHCⅠ类分子;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2016 年 37 卷 05 期

页码： 38-42

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料,构建了鸡MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达,进而制备鸡MHCⅠ分子的多克隆抗体。应用PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m基因,构建重组载体pETMHCⅠα和pET-MHCⅠβ2m,经PCR、双酶切和测序鉴定后,将重组质粒在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,融合蛋白纯化后,接种昆明小鼠制备多克隆抗体,血清稀释后用免疫印迹法(Western blot)分析。结果表明,鸡MHCⅠα和β2m基因在大肠埃希菌中成功表达,融合蛋白分子质量分别约为52.1ku和33.0ku;制备的鼠抗鸡MHCⅠα和β2m链多克隆抗体,经Western blot检测证实抗体特异性较强,可进一步用于鸡MHCⅠ分子的研究。

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