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鸡MHCⅠα和β2m链基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 戴银 1 ; 胡晓苗 1 ; 赵瑞宏 1 ; 侯宏艳 1 ; 沈学怀 1 ; 潘孝成 1 ; 周学利 1 ; 张丹俊 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鸡MHCⅠα基因;鸡MHCⅠβ2m链基因;真核表达载体;293T细胞

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2016 年 43 卷 08 期

页码： 1938-1943

收录情况： 北大核心

摘要： 为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类(major histocompatibility complex,MHCⅠ)分子在免疫应答中的作用机制,试验经PCR克隆获得MHCⅠα和β_2m链基因,随后插入带有荧光标签蛋白的真核表达载体,成功构建了重组质粒pEGFP-MHCⅠα和pmCherry-MHCⅠβ_2m,并通过脂质体法转染293T真核表达细胞。荧光显微镜观察可见,MHCⅠα和β_2m分子主要分布于真核细胞的内膜系统,改变了与之融合的荧光蛋白在细胞内的定位。此外,Western blotting检测可见大小约68.3和41.3ku的目的蛋白反应带,表明重组质粒能够在293T细胞中顺利表达,且表达蛋白与鸡MHCⅠ类分子的相应抗体可发生特异性结合反应,具有良好的免疫学活性。

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