文献类型： 中文期刊
作者： 戴银 1 ; 程宝艳 1 ; 胡晓苗 1 ; 王骏俊 2 ; 陈芳芳 2 ; 余为一 2 ;
作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
2.安徽农业大学动物科技学院
关键词： 鸡MHCⅠa链;鸡MHCⅠβ2m链;融合蛋白
期刊名称： 中国畜牧兽医
ISSN： 1671-7236
年卷期： 2011 年 038 卷 003 期
页码： 61-64
收录情况： 北大核心
摘要： 为进一步研究MHCI类分子作用机制,以及为制备MHCI基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHC Ⅰβ2m-a融合基因进行原核表达.运用RT-PCR方法,克隆鸡MHC Ⅰa和β2m链基因,并通过编码连接肽(Gly4 Ser).的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHC Ⅰβ2m-a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coliBL2 Ⅰ细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物.结果表明,成功克隆了MHCⅠa和β2m链基因,长度分别为1014和300 by;构建的融合基因MHCⅠβ2m-a长度为1194 by,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性.
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