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猪圆环病毒3型和4型TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 殷冬冬 1 ; 王洁茹 1 ; 尹磊 1 ; 沈学怀 1 ; 戴银 1 ; 赵瑞宏 1 ; 侯宏艳 1 ; 胡晓苗 1 ; 王桂军 2 ; 潘孝成 1 ;

作者机构： 1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

2.安徽农业大学动物科技学院

关键词： 猪圆环病毒3型;猪圆环病毒4型;TAQMAN;实时荧光定量PCR

期刊名称： 安徽农业大学学报

ISSN：

年卷期： 2023 年 006 期

页码： 979-984

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立一种快速检测猪圆环病毒3型(PCV3)和4型(PCV4)的TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法,根据Gen Bank已登录的PCV3和PCV4基因保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,经优化各反应条件,构建标准曲线,分析其敏感性、特异性和重复性,并利用建立的荧光定量PCR方法对采自安徽省的临床样品进行检测,与普通PCR方法进行一致性评价.结果显示,PCV3的标准曲线为Y=–3.534 6 logX+41.11(R2=1.00),PCV4的标准曲线为Y=–3.382 5 logX+40.67(R2=1.00).PCV3和PCV4的检测限分别为49.5和27.1 copies·μL-1.对猪圆环病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)无特异性扩增,组内和组间变异系数均<1%.临床样品检测结果显示,PCV3阳性检出率为40.8%,PCV4阳性检出率为20.4%,混合感染率为19.0%.建立了灵敏、特异,可同时快速、准确鉴别PCV3和PCV4的TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法,为PCV3和PCV4的检测和监测提供技术支撑.

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[2]西花蓟马qRT-PCR与常规PCR快速检测比较. 汤云霞,严丹侃,范加勤. 2012

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