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栝楼的RAPD-PCR体系建立与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 曲益涛 1 ; 董玲 2 ; 江芹 2 ; 宁志怨 2 ; 廖华俊 2 ;

作者机构： 1.安徽农业大学园艺学院

2.安徽省农业科学院

关键词： 栝楼;RAPD;分子标记;优化

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2010 年 38 卷 13 期

页码： 536-538

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化。[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化。[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为:Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs。通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为:在25μl反应体系中,含10×buffer2.5μl,Mg2+2.0mmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L,dNTPs0.1mmol/L。反应程序为94℃预变性2mim;94℃变性30s,37℃退火温度40s,72℃延伸1.5mim,36次循环;72℃延伸10mim,4℃保存。[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法。

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