文献类型: 中文期刊
作者: 曲益涛 1 ; 董玲 2 ; 江芹 2 ; 宁志怨 2 ; 廖华俊 2 ;
作者机构: 1.安徽农业大学园艺学院
2.安徽省农业科学院
关键词: 栝楼;RAPD;分子标记;优化
期刊名称: 安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2010 年 38 卷 13 期
页码: 536-538
收录情况: 北大核心
摘要: [目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化。[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化。[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为:Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs。通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为:在25μl反应体系中,含10×buffer2.5μl,Mg2+2.0mmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L,dNTPs0.1mmol/L。反应程序为94℃预变性2mim;94℃变性30s,37℃退火温度40s,72℃延伸1.5mim,36次循环;72℃延伸10mim,4℃保存。[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法。
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