科研产出
哺乳动物N-糖基化途径中关键酶唾液酸合酶和CMP-唾液酸合成酶基因在转基因家蚕中的表达
《昆虫学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：对昆虫的N-糖基化途径进行修饰改变是扩展昆虫蛋白表达系统应用范围的重要途径。本研究利用基于piggyBac转座子的家蚕Bombyx mori转基因技术表达昆虫所缺乏的哺乳类糖基化途径中的关键基因,构建了可以同时表达小鼠Mus musculus唾液酸合酶和小鼠CMP-唾液酸合成酶两个基因的piggyBac表达载体,选用家蚕肌动蛋白A3启动子控制基因的表达,并导入3×P3启动子控制下的增强绿色荧光蛋白EGFP作为分子标记。在得到的G1代转基因家蚕中对转入的基因进行了分子水平的鉴定和分析,为在家蚕这种模式昆虫中模拟哺乳类糖基化途径奠定了基础。
关键词： 糖蛋白 N-糖基化途径 家蚕 转基因 唾液酸合酶 CMP-唾液酸合成酶
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利用Cre/loxP系统删除转Bt基因水稻中的选择标记基因
《生物学杂志 》 2011 CSCD
摘要：来源于噬菌体P1的Cre/loxP位点特异性重组系统是目前在植物遗传转化中应用较多,较成熟的一个标记基因删除系统。在这个系统中,Cre酶可以特异性的识别和切割位于两个lox位点之间的标记基因,整个系统重组仅需Cre和lox识别位点即可完成而无需其它辅因子的参加。利用农杆菌介导法成功地将cre基因导入供试材料"皖粳97",得到转hpt-cre基因水稻植株;将其与先期转基因育成的携带loxp-hpt-loxp-bt基因的"皖粳97"株系进行田间杂交,通过PCR分析,Cre/loxP重组系统定向删除了潮霉素抗性筛选标记基因。
关键词： 水稻 转基因 Bt Cre/loxP系统
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以pmi为筛选标记的水稻转基因研究
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：[目的]建立一种快速、高效的甘露糖安全筛选体系。[方法]以绿色荧光蛋白(GFP)编码基因为报告基因,用农杆菌介导的方法将磷酸甘露糖异构酶基因(pmi)转入水稻品种皖粳97,并对转化和筛选条件进行优化。[结果]受体品种皖粳97,在32℃光照条件下诱导愈伤的出愈率可达90.3%,且生长较快;培养基中甘露糖筛选压力以5g/L蔗糖+15g/L甘露糖较为适宜,在该条件下筛选21d,进而分化成苗,转化频率可达20.6%。[结论]该研究确立的甘露糖筛选体系,能明显缩短筛选周期、提高转化效率,有利于转基因水稻的安全生产。
关键词： 水稻 转基因 甘露糖 绿色荧光蛋白(GFP)
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根癌农杆菌介导Bt基因转化水稻的研究
《生物学杂志 》 2009 CSCD
摘要：为了培育出无筛选标记基因的转基因水稻,试验将loxp-hpt-loxp基因与Bt基因连锁在一起转化水稻方法,得到loxp-hpt-loxp-Bt转基因水稻植株,再与同质的带有cre基因的水稻杂交,以定向删除潮霉素抗性筛选标记。试验表明以水稻品种"皖粳97"为供试材料,将成熟胚来源的愈伤组织用根癌农杆菌EHA105/pCAMBIA1305.1感染后,筛选出抗性愈伤组织并获得再生植株。经PCR验证,得到20棵转基因水稻植株。
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转Xa21基因不育系皖21A的白叶枯病抗性与利用
《中国水稻科学 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：利用基因枪转化法将Xa2 1基因导入 80 4B(BT型不育系 80 4A的保持系 ) ,选育出纯合稳定的株系皖 2 1B。以80 4A与皖 2 1B连续回交转育 ,育成了高抗白叶枯病的不育系皖 2 1A ,对皖 2 1A和皖 2 1B的不同世代材料进行PCR分析和田间白叶枯病菌抗性试验 ,表明Xa2 1基因稳定遗传且抗性稳定。皖 2 1A与恢复系R 18、HP12 1、U16 0配制杂交组合具有良好的抗病性和产量潜力。
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