水禽3种免疫抑制性病毒多重PCR检测方法的建立与应用

戴银; 杨雪; 童雨芹; 吴希; 陈瑝儿; 仲月怡; 胡晓苗; 王洁茹; 殷冬冬; 尹磊; 沈学怀; 潘孝成; 赵瑞宏; 《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：禽流感病毒H9亚型(AIV-H9)、鹅圆环病毒(GoCV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)是水禽常见病原,常发生混合感染且易导致水禽的免疫抑制性疾病.本研究针对AIV-H9、GoCV和MDRV的基因序列,分别设计特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立了这3种病毒的多重PCR检测方法,并进行特异性、灵敏度和可重复性验证.结果显示,建立的三重PCR检测方法能特异性扩增AIV-H9、GoCV和MDRV的 目的片段,与新型鹅星状病毒、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽腺病毒4型无交叉反应;最低检出浓度分别为2.93× 104 copies/μL、2.5× 102 copies/μL、3.0× 106 copies/μL;利用该方法对 30 份临床样品进行检测,MDRV检出率为6.7%,GoCV和AIV-H9的检出率较高,分别为36.7%和26.7%.三重PCR与单重PCR的符合率为100%.结果表明,该三重PCR检测方法特异、灵敏、稳定性好,能够用于这3种病毒的流行病学调查和临床检测.

关键词： 禽流感病毒H9亚型 鹅圆环病毒 番鸭呼肠孤病毒 三重PCR