枯草芽孢杆菌表达柱状黄杆菌lip基因口服疫苗对草鱼免疫保护效果的研究

罗璋; 陈红莲; 张振国; 郝爽; 韩进刚; 孙少起; 冯守明; 《渔业科学进展 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种水产益生菌,最近也被用作口服疫苗的投递载体。本研究利用前期筛选到的柱状黄杆菌（Flavobacterium columnare）保护性抗原基因lip,与pBE2R载体连接后,以质粒的方式转入枯草芽孢杆菌WB800中,构建了重组菌株WB800 （pBE2R-lip）。聚丙酰胺电泳和免疫印迹实验表明,枯草芽孢杆菌WB800 （pBE2R-lip）能表达lip蛋白,其分子量约为32 kDa。利用枯草芽孢杆菌WB800 （pBE2R-lip） 口服免疫草鱼（Ctenopharyngodon idellus）后,通过酶联免疫吸附实验,在受免草鱼血清中检测到特异性抗体效价的上升,在人工感染实验中,受免草鱼的免疫保护率为52.4%。本研究表明,利用枯草芽孢杆菌能有效表达柱状黄杆菌的lip基因,以其作为口服疫苗能引起草鱼的免疫应答并提供免疫保护效果。

关键词： 柱状黄杆菌 枯草芽孢杆菌 草鱼 口服疫苗