空心莲子草致病菌假隔链格孢菌原生质体的制备与再生

周凤艳; 张勇; 周振荣; 刘小林; 《植物保护学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为建立空心莲子草致病菌假隔链格孢菌Nimbya alternantherae的原生质体提取体系,以其强致病性野生型菌株N.alternantherae 11-2为供试菌株,研究了不同菌龄、酶系统、酶解时间及稳渗剂等对假隔链格孢菌原生质体制备及再生的影响,并采用聚乙二醇PEG介导转化法,构建了随机插入突变体库。结果表明,在酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中培养2 d的假隔链格孢菌丝体,以0.7 M山梨醇为稳渗剂,同时使用2%裂解酶、2%崩溃酶和2%蜗牛酶3种酶的混合液,在30℃下酶解3 h能获得足量的原生质体,且其再生率也可满足后继转化试验的要求。

关键词： 假隔链格孢菌 原生质体 突变体