家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的克隆及序列分析与融合表达

章玉萍; 蒋剑豪; 赵云坡; 汤强; 代君君; 王储炎; 吴传华; 范涛; 苗雪霞; 《蚕业科学 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：异三聚体G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到细胞内的重要分子,参与生物体内广泛的信号转导途径。采用生物信息学方法和RT-PCR、RACE技术克隆了家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的全长cDNA序列,该序列全长1374 bp,开放阅读框(ORF)1 128 bp,编码375个氨基酸。将构建的表达载体pET-41b(+)-Gα12转化E.coli BL21宿主菌进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测显示,BmGα12可在E.coli BL21中高效表达,GST-BmGα12融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量约71 kD。系统进化分析显示BmGα12与大鼠和人Gα12/Gα13的亲缘关系较近,初步推测BmGα12介导的信号传导同样在细胞生长、胚胎发育中起重要作用。

关键词： 家蚕 G蛋白α亚基 基因克隆 序列特征 融合蛋白

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