鳜源致病性舒伯特气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

陈红莲; 王永杰; 鲍俊杰; 孙雯; 张静; 侯冠军; 程云生; 《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：【背景】舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)广泛分布于淡、海水水体和底泥中，致病株已在我国养殖鳢科鱼类中流行，也感染其他经济鱼类，导致暴发性死亡。【目的】对病鳜(Siniperca chuatsi)的病原进行鉴定，确定分离菌的致病性及药物敏感性，为该病临床治疗提供参考。【方法】采集病鳜脾肾组织进行PCR或RT-PCR扩增其常见病毒，采集病鳜肝脏和腹水分离培养细菌，PCR扩增代表菌株的gyrB、16S rRNA和毒力基因，鉴定其生理生化特征，并进行药物敏感性试验和人工感染试验。【结果】病鳜的传染性脾肾坏死病毒、鳜蛙病毒、鳜弹状病毒检测结果为阴性，肝脏和腹水均存在大量细菌；代表菌株Gui210820被鉴定为舒伯特气单胞菌，携带溶血素、气溶素、弹性蛋白酶和磷脂酶毒力基因，腹腔注射感染鳜的半数致死浓度(LD50)为3.16×105 CFU/mL；菌株Gui210820对四环素、卡那霉素、复方新诺明等6种抗菌药物耐药，对强力霉素中介，对恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考等11种抗菌药物敏感。【结论】本试验从病鳜组织分离到致病性舒伯特气单胞菌，水产准许用药物恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考可以用于本次疾病的临床治疗。

关键词： 鳜 舒伯特气单胞菌 毒力基因 致病性 药物敏感性

安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒缺失区序列分析

陈红莲; 王永杰; 程云生; 宋光同; 《水产科技情报 》 2018

摘要：为了解安徽省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)缺失区ORF23/24和ORF14/15的遗传差异及其与世界各地WSSV的遗传进化关系,2016年4月—8月,在安徽省6个市采集了9个养殖克氏原螯虾样本进行WSSV套式PCR检测,扩增病毒缺失区ORF23/24和ORF14/15,将获得的序列进行比较分析。结果显示,9个样本均在第1轮PCR扩增中获得阳性结果,其ORF23/24区与中国台湾株(TW)比对,缺失5 892 bp或9 310 bp,其ORF14/15区与WSSV祖先株(TH-96-Ⅱ)比对,缺失5138 bp或5948 bp。其中8个样本中WSSV与2008至2010年在江苏的克氏原螯虾中检测到的一些毒株的ORF23/24和ORF14/15区缺失情况相同,且这些病毒ORF14/15区均缺失5 138 bp,与TW株缺失情况相同。

关键词： 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 ORF23/24 ORF14/15 序列分析

草金鱼的遗传特性及人工选育方法

程云生; 蒋业林; 王芬; 徐世红; 王永杰; 陈红莲; 潘庭双; 《安徽农学通报 》 2018

摘要：该文介绍了草金鱼的分类地位、生活和繁殖习性、遗传与变异、人工选育方法、现代生物育种技术等,并对其市场应用开发前景作出了展望,为推动草金鱼的遗传改良研究提供参考。

关键词： 草金鱼 遗传 人工选育

克氏原螯虾白斑综合征的病因分析与防治措施

王永杰; 陈红莲; 程云生; 《科学养鱼 》 2017

摘要：一、病因分析从病毒携带率来看,白斑综合征已经普遍存在于养殖的克氏原螯虾之中,病毒携带率可达80%以上,池塘的枝角类和桡足类也能感染,在疾病传播中起到一定作用,因此,在已经暴发过白斑综合征疾病的池塘,彻底杀灭水体和环境中残存的病毒存在一定的难度。克氏原螯虾病害防治研究基础比较差,广大养殖业者面对突然暴发的克氏原螯虾疾病缺乏恰当的防治对策,一些针对水

外塘中华鳖病害生态防控效果分析

程云生; 蒋业林; 李翔; 陈红莲; 侯冠军; 王永杰; 《安徽农学通报 》 2017

摘要：为检验外塘中华鳖疾病的生态防控效果,该研究选用4口条件相同且相邻的外池塘,分别进行了中华鳖疾病生态防控与常规防控试验,试验周期193d。结果显示:采用生态防控的3口池塘,中华鳖传染性和非传染性病害的发病率显著下降,其成活率提升3~6个百分点,净增重量提高10.4%~19.3%,饵料系数下降0.21~0.30,表明生态防控效果优势明显。

关键词： 中华鳖 病害 生态防控

安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒变异区序列分析

陈红莲; 王永杰; 蒋业林; 程云生; 张静; 王芬; 《安徽农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：白斑综合征已给安徽省克氏原螯虾产业带来了巨大的经济损失。为了解安徽省白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)分子流行病学,2016年4—8月在安徽省6个市采集9个养殖的克氏原螯虾样本进行WSSV套式PCR检测,扩增病毒可变区ORF94、ORF75和ORF125,将获得序列进行比较分析。结果显示,9个样本均在第1轮PCR扩增中获得阳性结果,其ORF94的重复单元(repeat unit,RU)数量为2、4、7、8和12,2RUs为常见基因型,ORF75的组合RUs总数为3、6、9、10和11,9 RUs为常见基因型,排列顺序为45、102、45、102、3×45、102和45,ORF125的RUs为5~9,其中7 RUs和6 RUs为常见基因型。

关键词： 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 ORF94 ORF75 ORF125 序列分析

黄金鲫内脏类结节病的病原鉴定与药物敏感性试验分析

王永杰; 陈红莲; 程云生; 王芬; 《中国农业科技导报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：淡水养殖鱼类结节病是近年来时常爆发的疾病之一,为了有效预防和防治该病,从合肥郊区某养殖场濒死的黄金鲫(鲤鱼♀×鲫鱼♂)体内分离优势致病菌(命名为AH菌株),对其进行了鉴定。采用传统细菌分类方法,测定该菌株的形态特征、生理生化特性和常见药物的敏感性;应用分子生物学方法,对病原菌16S rRNA特异片段进行克隆、序列测定分析。AH菌株与对照鮰爱德华氏菌在形态特征和生理生化特性基本一致。序列分析结果显示分离的AH菌株与鮰爱德华氏菌(AB050826,NR_024769)菌株间基因序列同源性为99.9%以上,在系统发育树上与鮰爱德华氏菌聚为一族。人工回归复感染健康黄金鲫鱼,出现与原发性相似的内脏类结节病症状。药敏实验结果显示:AH菌株对氧氟沙星等11种药物敏感,对四环素等4种抗生素耐药,对磺胺类药物复方新诺明中度敏感。综合分析认为鮰爱德华氏菌是黄金鲫内脏类结节病的重要致病菌,该结果为黄金鲫内脏类结节病有效防控提供有益参考。

关键词： 黄金鲫鱼 病原菌分离鉴定 药敏试验 复感染试验 同源分析