科研产出
鳜源致病性舒伯特气单胞菌的分离鉴定及药敏试验
《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)广泛分布于淡、海水水体和底泥中，致病株已在我国养殖鳢科鱼类中流行，也感染其他经济鱼类，导致暴发性死亡。【目的】对病鳜(Siniperca chuatsi)的病原进行鉴定，确定分离菌的致病性及药物敏感性，为该病临床治疗提供参考。【方法】采集病鳜脾肾组织进行PCR或RT-PCR扩增其常见病毒，采集病鳜肝脏和腹水分离培养细菌，PCR扩增代表菌株的gyrB、16S rRNA和毒力基因，鉴定其生理生化特征，并进行药物敏感性试验和人工感染试验。【结果】病鳜的传染性脾肾坏死病毒、鳜蛙病毒、鳜弹状病毒检测结果为阴性，肝脏和腹水均存在大量细菌；代表菌株Gui210820被鉴定为舒伯特气单胞菌，携带溶血素、气溶素、弹性蛋白酶和磷脂酶毒力基因，腹腔注射感染鳜的半数致死浓度(LD50)为3.16×105 CFU/mL；菌株Gui210820对四环素、卡那霉素、复方新诺明等6种抗菌药物耐药，对强力霉素中介，对恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考等11种抗菌药物敏感。【结论】本试验从病鳜组织分离到致病性舒伯特气单胞菌，水产准许用药物恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考可以用于本次疾病的临床治疗。
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嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)引起斑马鱼肠道生理损伤和肠道菌群失调
《海洋与湖沼 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：研究分析了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染斑马鱼后肠道生理健康和肠道微生物的变化。以斑马鱼为研究对象,刮伤皮下真皮,使用105 CFU/mL浓度的嗜水气单胞菌暴露6 h后转入清水,分别在暴露前、暴露后6 h、12 h、24 h取样。使用鱼特异性酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒,检测肠道中紧密连接蛋白ZO-2 (TJP2)含量和乙氧基异戊二烯-O-脱乙基酶(EROD)酶活性,结果表明,嗜水气单胞菌暴露引起了斑马鱼肠道生理损伤,表现为肠道TJP2含量、EROD酶活性在暴露后显著下调。采用16S rRNA高通量测序检测肠道微生物及其菌群结构变化,嗜水气单胞菌暴露斑马鱼后致病菌不动杆菌属(Acinetobacter)明显增加,OTUs数量明显下降,Alpha多样性降低,结果说明嗜水气单胞菌引起了斑马鱼肠道菌群失调。肠道中微生物的多样性与改善肠道上皮和黏膜屏障功能紧密相关,该研究对从肠道健康的角度评价嗜水气单胞菌毒性,探索嗜水气单胞菌的致病机制具有重要意义。
关键词： 嗜水气单胞菌 斑马鱼 肠道微生物 Alpha多样性 TJP2
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嗜水气单胞菌菌落多重PCR方法的建立及应用
《微生物学通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对水产动物、畜禽和人类均有致病性.基因表达的溶血素、气溶素和肠毒素是重要毒力因子,在致病性嗜水气单胞菌早期检测及防治中尤为重要.目前采用菌落直接提取DNA用于多重PCR研究的相关报道较少.[目的]基于菌落PCR方法建立针对嗜水气单胞菌溶血性基因、肠毒素基因和16S rRNA基因特异性片段(5个基因片段)的多重PCR快速检测方法.[方法]采用选择性RS (Rimler-Shotts)培养基对样品中嗜水气单胞菌有效富集分离和辨认,建立并优化嗜水气单胞菌16S rRNA、ast、alt、 aerA、act这5个基因的多重PCR方法,比较菌落PCR中DNA模板不同提取方法对多重PCR扩增结果的影响,并检测该方法对维氏气单胞菌、温和气单胞菌、杀鲑气单胞菌的特异性.[结果]通过对RS培养基上单菌落的16S rRNA基因鉴定,初步判定嗜水气单胞菌和其他可培养菌的菌落形态,对其富集程度进行可视化辨别.多重PCR反应体系优化结果显示,引物浓度最优配比为16S rRNA∶ast∶alt∶aerA∶act=1∶2∶2∶3∶4.菌落PCR结果显示,新鲜菌液采用煮沸冷冻离心法和煮沸离心法均能扩增出清晰条带,采用单菌落处理则需煮沸冷冻离心法.该多重PCR方法具有特异性.[结论]利用菌落多重PCR可以不通过试剂盒抽提获得DNA模板,简便、直观地检测嗜水气单胞菌及其毒力基因,具有特异性.
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安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒和虾虹彩病毒检测及分析
《安徽农业科学 》 2021
摘要：2020年检测安徽省滁州、安庆和合肥的20个稻田养殖的200只克氏原螯虾（Procambarus clarkii）鳃组织中白斑综合征病毒和虾虹彩病毒,结果发现白斑综合征病毒阳性检出率为97.5%,病毒含量达106拷贝/mg的检出率与克氏原螯虾死亡率呈正相关。虾虹彩病毒阳性检出率为13%,只在滁州的3个和合肥的2个稻田的养殖虾中检出。
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水产养殖中嗜水气单胞菌拮抗菌的研究进展
《江苏农业科学 》 2020 北大核心
摘要：水产养殖密度的增加,加大了疾病暴发的风险.嗜水气单胞菌感染的宿主多种多样,毒力因子复杂,为疾病的治疗和防控带来困难.目前水产上对嗜水气单胞菌的防控主要依赖抗生素、化学药物等,容易导致环境中药物残留、病原菌耐药性增加等问题.本文着重对水产养殖中嗜水气单胞菌及其拮抗菌的体外筛选方法、拮抗作用研究方法和拮抗机制(产生抑菌物质、竞争性黏附、群体感应猝灭、竞争营养物质、增强机体免疫功能和抗氧化功能)进行重点归纳阐述,并对拮抗菌在水产养殖中的应用和安全性方面的相关研究进行概述,旨在为嗜水气单胞菌拮抗菌的研发以及水产动物的疾病防控研究提供参考依据.
关键词： 拮抗菌 嗜水气单胞菌 拮抗机制 疾病防控 水产养殖
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安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒检测及疾病分析
《水产养殖 》 2020
摘要：2018年4—5月在安徽省4个市采集稻田养殖的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)样本480份,采集池塘、水库的野生克氏原螯虾样本180份,进行白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)套式PCR检测,并对稻田的水环境、虾的养殖密度、产量及疾病发生情况进行跟踪调查。结果显示,野生虾、养殖虾的WSSV携带率分别为8.89%、98.13%。虾中WSSV首轮PCR检测阳性率≥50%的稻田有10个,其中5个稻田中高密度养殖虾的病死率达20%及以上,5个稻田中适宜密度养殖虾的病死率为10%及以下。pH值偏高、溶解氧过饱和的5号稻田和溶解氧过饱和的6号稻田中高密度养殖虾的病死率也分别高至50%、60%。
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发酵饲料在克氏原螯虾喂养中的应用研究
《安徽农业科学 》 2019
摘要：[目的]优化植物源蛋白发酵饲料的生产工艺,探讨发酵饲料替代传统膨化饲料饲养克氏原螯虾的可能性。[方法]以小肽含量为指标,对枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酵母菌3个菌种的混合发酵工艺条件进行优化,并用该工艺条件生产的发酵饲料来饲养克氏原螯虾。[结果]枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酵母菌3个菌种混菌发酵最佳工艺条件为接种量15%、固液比2∶1(g∶mL)、发酵时间96 h、温度32℃,且接种枯草芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌的比例为12∶3∶2;原料经过混合菌发酵后,小肽含量提高了约10倍,粗纤维含量有所降低,粗蛋白、灰分和粗脂肪含量变化不明显。采用发酵饲料喂养的克氏原螯虾,在生长初期增重速率明显高于投喂膨化饲料的,发酵饲料组虾田水体pH和溶氧都略低于膨化饲料组,氨氮对比差异不明显。[结论]发酵饲料更易于克氏原螯虾生长初期消化吸收,可部分代替膨化饲料使用,且对水质影响较小。
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安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒缺失区序列分析
《水产科技情报 》 2018
摘要：为了解安徽省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)缺失区ORF23/24和ORF14/15的遗传差异及其与世界各地WSSV的遗传进化关系,2016年4月—8月,在安徽省6个市采集了9个养殖克氏原螯虾样本进行WSSV套式PCR检测,扩增病毒缺失区ORF23/24和ORF14/15,将获得的序列进行比较分析。结果显示,9个样本均在第1轮PCR扩增中获得阳性结果,其ORF23/24区与中国台湾株(TW)比对,缺失5 892 bp或9 310 bp,其ORF14/15区与WSSV祖先株(TH-96-Ⅱ)比对,缺失5138 bp或5948 bp。其中8个样本中WSSV与2008至2010年在江苏的克氏原螯虾中检测到的一些毒株的ORF23/24和ORF14/15区缺失情况相同,且这些病毒ORF14/15区均缺失5 138 bp,与TW株缺失情况相同。
关键词： 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 ORF23/24 ORF14/15 序列分析
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涨渡湖浮游生物群落结构与富营养化研究
《海洋湖沼通报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：2014年4～9月,对涨渡湖水体的氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、总氮、总磷、浮游生物等进行了每月一次的调查和分析。结果显示:涨渡湖水体已中度富营养化;主要富营养化因子为氮;氮的富营养化评价指数波动于52～69,磷的富营养化评价指数波动于26～50。浮游植物的Shannon-Wiener指数波动于1.38～1.74,Pielou指数波动于0.34～0.43,Simpson,s指数波动于0.54～0.67,McNaughton指数波动于0.68～0.92,Margalef指数波动于3.21～3.65,生物多样性综合指数波动于1.76～1.62。涨渡湖水体的富营养化程度正在迅速加重;水体富营养化主要原因是面源污染;渔业生产对涨渡湖浮游生物群落结构有显著的负面影响,并提出了保护涨渡湖水域环境,防止其富营养化程度进一步加剧的相关措施。
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